论文部分内容阅读
目的研究IgG3型抗dsDNA抗体能否穿透进入人肾小球系膜细胞,建立一套体外培养的人体肾小球系膜细胞穿透模型,探讨IgG型抗dsDNA抗体细胞穿透在LN发病机制中的作用,验证抗dsDNA抗体能够选择性穿透肾细胞导致狼疮肾炎的假说。方法使用异硫氰酸荧光素(FITC)标记单克隆鼠抗人IgG3型抗dsDNA抗体;体外培养人肾小球系膜细胞。将FITC标记的IgG3型抗dsDNA抗体与系膜细胞在37℃避光孵育45分钟,荧光显微镜观察细胞内荧光,确定IgG3型抗dsDNA抗体能否穿透活的人肾小球系膜细胞。将系膜细胞随机分为四组,分别于37℃避光孵育1分钟,15分钟,30分钟和45分钟,使用激光扫描共聚焦显微镜观察IgG3型抗dsDNA抗体穿透进入系膜细胞的动态过程并进行定量分析。采用SPSS10.0进行统计分析。结果荧光显微镜镜检显示IgG3型抗dsDNA抗体能够穿透人肾小球系膜细胞进入细胞质并且能够同细胞核结合。激光扫描共聚焦显微镜显示,人肾小球系膜细胞在与IgG3型抗dsDNA抗体孵育不同时间后,各组之间细胞荧光强度不同(P<0.001),两两比较差异具有统计学意义(P<0.001),并且细胞内的荧光强度与孵育时间呈正相关(rs= 0.967, P<0.001),在避光孵育达到45分钟时即可观察到IgG3型抗dsDNA抗体大量与细胞核结合。结论IgG3型抗dsDNA抗体具有穿透进入活细胞的能力,并且可能具有穿透进入细胞核定位于细胞核内的能力。IgG3型抗dsDNA抗体穿透细胞是一个动态过程,抗体进入细胞内的量随孵育时间的延长而增加,并且该抗体穿透细胞可能会受到许多因素的影响。提示SLE患者体内的IgG型抗dsDNA抗体有可能通过选择性的穿透肾脏组织的活细胞引起肾脏器官发生损害。