山西省鹿出血性肠炎病原体的分离及其鉴定

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鹿出血性肠炎主要是由产气荚膜杆菌(Clostridium perfringens)所引起的一种以发病急、病程短、病死率高为显著特征的急性传染病。通过对山西省内不同地区鹿场发生出血性肠炎的11例病例的脏器及其肠内容物进行细菌分离培养,分离到了8株产气荚膜杆菌,并且对所分离到的产气荚膜杆菌进行毒型鉴定后发现,引起山西省内鹿发生出血性肠炎的病原菌主要是A型产气荚膜杆菌,可占87.5%,少量为C型,约12.5%。此外对病死鹿脏器的病理组织学观察发现,病死鹿小肠粘膜层完全坏死、脱落,粘膜下层严重出血;由于肝脏和肾脏结构受损,致使病原菌所产生的毒素不能得到及时分解,并排出体外,从而引发毒血症,导致鹿快速死亡,表现为出血性肠炎。PCR(聚合酶链式反应)作为一种快速、高效的分子生物学实验方法,已在疾病诊断,细菌鉴定和血清型分型上开始得到应用。在产气荚膜杆菌所产生的多种毒素中,其中以α毒素、β毒素、ε毒素和ι-毒素最为重要。本试验根据已报道的上述四种毒素基因设计PCR引物并建立其快速诊断方法,该方法特异性强,仅能检测出产气荚膜杆菌,并且能对所分离的产气荚膜杆菌进行分型;敏感性高,灵敏度可达1.0×10~4CFU/g。初步应用结果表明,本试验所建立的多重PCR诊断方法适用于鹿以及其它动物A型产气荚膜杆菌病的临床诊断和流行病学调查。
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