研究背景胰腺癌是一种恶性程度极高、预后极差的实体肿瘤,5年生存率不足10%,化疗耐药是影响患者预后改善的关键因素。基于PDX模型的转录组测序结果提示SDF2L1与胰腺癌化疗耐药相关。SDF2L1是一种定位于内质网的蛋白,在乏血供、缺氧、营养缺乏等环境刺激下参与识别错误折叠的蛋白并启动UPR,是响应内质网应激信号的关键分子之一。目前关于SDF2L1蛋白的研究多集中于慢性内质网应激所导致的疾病,如慢性肺病、脂肪肝、病理妊娠等,在实体肿瘤中的研究较少,SDF2L1在胰腺癌化疗耐药中的作用及机制尚无报道。研究目的研究SDF2L1在胰腺癌组织中表达水平的临床意义,研究SDF2L1对胰腺癌细胞化疗耐药、增殖、克隆形成与迁移能力的影响,探索SDF2L1介导胰腺癌化疗耐药的分子机制,为探索胰腺癌化疗耐药的形成机制、寻找新的治疗靶点和耐药解决方案提供依据。研究方法我们首先通过免疫组织化学染色检测胰腺癌病理组织中SDF2L1表达水平,利用RT-qPCR与Western Blot检测不同细胞系SDF2L1表达水平。其次构建siRNA、过表达质粒与慢病毒,以干扰胰腺癌细胞系中SDF2L1的表达,并通过CCK-8法、平板克隆实验、划痕愈合实验与Transwell实验研究敲低或过表达SDF2L1对胰腺癌细胞耐药、增殖、迁移能力的影响,通过构建裸鼠皮下移植瘤模型在体内条件下研究过表达SDF2L1对胰腺癌生长及化疗耐药性的影响。进一步利用RT-qPCR与Western Blot探索SDF2L1对UPR通路及潜在下游通路的调控机制,并且设计了内质网定位序列缺失的SDF2L1过表达质粒、引入UPR抑制剂HA15以进行挽救实验。研究结果免疫组织化学染色结果提示SDF2L1在胰腺癌组织中表达量显著高于癌旁组织,且胰腺癌组织中SDF2L1表达量与患者不良预后相关。AsPC-1耐药细胞株中SDF2L1表达量显著高于野生型细胞株,吉西他滨可诱导胰腺癌细胞SDF2L1表达量升高。体外表型实验提示敲低SDF2L1能降低胰腺癌细胞耐药、增殖、迁移能力,过表达SDF2LI则能够提升胰腺癌细胞耐药与迁移能力,体内实验也验证了过表达SDF2L1降低胰腺癌化疗敏感性的结论。进一步的机制研究发现SDF2L1激活UPR通路、NF-κB通路与EMT通路,对自噬通路有一定抑制作用,引入UPR抑制剂或去除SDF2L1蛋白的内质网定位序列均能回复上述调控作用,进而抑制过表达SDF2L1胰腺癌细胞的化疗耐药性。研究结论SDF2L1在胰腺癌组织中的表达量与患者不良预后相关,吉西他滨能诱导胰腺癌细胞SDF2L1表达水平升高。SDF2L1可能通过定位于内质网、激活UPR,进而抑制自噬、活化NF-κB通路与EMT通路,最终引起胰腺癌细胞化疗耐药。