研究目的:系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)作为一种严重危害人身健康的典型自身免疫性疾病,其病因、发病机制尚未完全阐明,临床表现错综复杂,治疗颇为困难。中医药治疗SLE有其自身的优点和鲜明的特色。其多部位、多环节和多靶点整体调节特色对于多基因调控、发病机理复杂、病情多变的系统性红斑狼疮的防治来说具有非常重要的意义。我们选择临床治疗系统性红斑狼疮有效的滋阴清热方,开展滋阴清热方对系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞分泌的细胞因子影响的研究,从细胞因子调控领域探讨滋阴清热方治疗系统性红斑狼疮的作用靶点、作用机理。从而加深对中医药治疗系统性红斑狼疮作用机理的理解,寻找有效的治疗系统性红斑狼疮的中西医结合方法。研究方法:1.含药血清的制备:制备滋阴清热方含药血清,以滋阴清热方成人剂量换算成滋阴清热方灌胃液对大鼠进行灌胃3天,于最后一次灌胃即末次给药后1h,分别心脏采血。滤膜过滤备用。2.系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞(PBMC)的分离与孵化:无菌采取阴虚内热型SLE患者空腹静脉血,经稀释、吹打、离心等步骤后分离PBMC,加入24孔板组织培养板内,置于5%CO2、37℃培养箱中培养。3.PBMC干预培养及MTT细胞凋亡检测,流式细胞仪对PBMC分泌细胞因子检测。4.设立激素组、不含药血清组、中药加激素组、中药组分别观察不同干预措施对阴虚内热型系统性红斑狼疮病人的的外周血单个核细胞分泌的细胞因子的影响。研究结果:1.细胞凋亡情况:中药加激素组、激素组可明显加速系统性红斑狼疮患者体外培养的PBMC的凋亡,提示系统性红斑狼疮患者体内的外周血单个核细胞非常活跃,由于SLE患者体内大量活跃的自身反应单核细胞的存在,滋阴清热方及激素可能通过诱导活跃的自身反应单个核细胞凋亡,减少自身反应单个核细胞数量起到治疗作用。2.对初发的活动性系统性红斑狼疮患者不同干预条件下的IL-2分泌情况进行检测,激素组、激素加中药组与空白组对照有统计学意义。中药组较空白组有所升高但无统计学意义。提示中药加激素、激素对活动期SLE患者分泌型Th1细胞因子的细胞活化有一定作用,而滋阴清热方配合激素联合应用有加强其效果的作用。本研究结果显示与空白组对照,滋阴清热方配合激素联合应用使系统性红斑狼疮患者PBMC分泌Th2型细胞因子IL-10水平明显降低,滋阴清热方组分泌的IL-10较空白组对照也有所减低,两者均具有统计学意义。3.药物(中药、激素)干预细胞因子的变化是以IL-10降低和IL-2升高为特征的,IL-10的降低可能抑制了B细胞过度增殖,减少了自身抗体的产生。研究结论:1.从细胞因子调控角度,滋阴清热方对阴虚内热型系统性红斑狼疮患者具有单独的治疗作用,并且与激素的作用机理有很多相似之处。2.滋阴清热方对单个细胞因子进行调节,进而对细胞因子网络进行整体的调控,其作用形式符合中医整体观的哲学思想,同时这种作用对系统性红斑狼疮的影响又是复杂的。3.通过对滋阴清热方、激素等不同干预措施对阴虚内热型系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞分泌的细胞因子的影响的研究,可能为我们研究系统性红斑狼疮的发病和防治提供新的思路。