【摘 要】
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肝细胞的恶性转化涉及到肝细胞基因组内一系列基因的变异和积累.为了进一步寻找肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)相关的新基因,以从分子水平进一步探讨HCC发生、发展的
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肝细胞的恶性转化涉及到肝细胞基因组内一系列基因的变异和积累.为了进一步寻找肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)相关的新基因,以从分子水平进一步探讨HCC发生、发展的机制,该室通过荧光-差异显示(fluorescent-fifferentialdisplay,FluoroDD)技术从人HCC组织、配对非癌肝(pairednon-cancerousliver,PNL)组织、胎肝(fetalliver,FL)组织和正常肝(normalliver,NL)组织获得了110条差异表达cDNA片段(DD片段),该研究从中选取了25条进行测序,并将测序结果在GenBankNR数据库中进行同源性分析;对其中12条DD片段通过RNA狭缝杂交验证其在HCC、PNL及NL组织中的表达规律.热休克蛋白(heatshockprotein,Hsp)90有Hsp90α和Hsp90β两种分子,它们在氨基酸序列的同源性为84﹪,分别由位于染色体14q32和6p12的不同基因编码.为了进一步探讨它们与HCC发生、发展的关系,该文采用以特异性复合cRNA为内参照的定量RT-PCR法对hsp90α和hsp90βmRNA在HCC、PNL和NL中的表达进行定量分析比较.该文通过EST(expressedsequencetag)拼接和RACE(rapidamplificationofcDNAends)克隆以及RT-PCR验证,得到一条847bp的cDNA克隆.该研究在mRNA水平证明了liprinβ1v在人肝组织及某些人类肿瘤细胞及正常系中确实存在,并揭示了它在HCC及转移潜能较高的肿瘤细胞系中表达下调,提示liprinβ1v表达的下调或许与肿瘤细胞的侵袭性与转移性有关.为了研究liprinβ1v的生物学效应,构建了真核细胞表达载体,用人293T细胞进行单独转染及与larcDNA共转染的实验研究.
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