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研究背景和目的胃癌(Gastric cancer,GC)是癌症相关死亡的第—二大原因。由于早期缺乏症状,大部分胃癌在发现时已经发生了转移。而胃癌晚期的治疗手段有限,5年生存率较低,因此,胃癌的肿瘤生长和转移机制值得进一步深入研究。近年来研究表明卷曲螺旋结构(coiled-coil domain-containing,CCDC)蛋白与许多恶性肿瘤的增殖和转移密切相关。CCDC43位于17号染色体上,具有高度保守性。GEPIA数据库显示,CCDC43 mRNA在卵巢癌、肺癌、头颈癌、子宫颈癌、乳腺癌、胃癌、肝癌和结肠癌等多种恶性肿瘤中表达上调。我们前期研究结果证实CCDC43结直肠癌中高表达,通过介导上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)促进结直肠癌的侵袭和转移。但到目前为止,CCDC43在胃癌中的生物学功能尚未明确。我们通过同位素绝对定量和相对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)筛选到 ADRM1 是 CCDC43 可能的下游靶标蛋白。同时通过生物信息学发现YY1是CCDC43和ADRM1的共同转录因子。本研究主要探讨CCDC43如何促进胃癌的增殖、侵袭和转移,拟为胃癌治疗提供新的潜在靶点。研究方法首先用实时荧光定量PCR、免疫组化染色检测CCDC43在胃癌及癌旁组织的表达水平,以及分析CCDC43的表达与临床病理参数及预后的关系。分别在胃癌细胞中过表达CCDC43和干扰CCDC43,检测CCDC43对胃癌细胞增殖,侵袭和迁移能力的影响。接着用iTRAQ联合质谱技术筛选到ADRM1可能是CCDC43的下游靶标蛋白。用免疫共沉淀技术验证CCDC43和ADRM1在是否存在相互作用,并利用免疫荧光检测两者的亚细胞定位。同时我们用CHX检测CCDC43对ADRM1稳定性的影响。此外,我们用一系列体内和体外的方法分析了 CCDC43通过ADRM1对胃癌的增殖,侵袭和转移能力的影响。生物学信息分析YY1是CCDC43和ADRM1的共同的转录因子。通过染色质免疫共沉淀和双荧光素酶实验分析YY1与CCDC43和ADRM1启动子的结合关系。用一系列体外实验检测YY1通过CCDC43-ADRM1轴对胃癌细胞生物学功能的影响。最后用western blot和IHC分析YY1/CCDC43/ADRM1在胃癌组织中的相关性。结果1.CCDC43在胃癌组织中高表达,CCDC43的表达高低与病人的预后相关。CCDC43表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、AJCC分期、肿瘤浸润以及肿瘤大小相关。CCDC43能促进胃癌的增殖、侵袭和转移。2.CCDC43与ADRM1在细胞浆内相互作用。CCDC43能提高ADRM1的稳定性,CCDC43通过ADRM1促进胃癌细胞的增殖、侵袭和转移。3.YY1 是 CCDC43 与 ADRM1 的共同转录因子,YY1、CCDC43、ADRM1在胃癌组织中正相关。YY1通过调控CCDC43-ADRM1轴促进胃癌的增殖、侵袭和转移。结论CCDC43在胃癌组织中高表达,CCDC43-ADRM1轴在转录因子YY1的调控下促进胃癌的增殖、侵袭和转移。