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目的本研究通过干预自噬基因Beclinl在SKOV3细胞中的表达量(过表达和表达抑制),应用基因芯片技术和荧光差异双向电泳-质谱技术检测出Beclinl干预后SKOV3细胞中mRNA和蛋白质的表达变化。方法体外培养卵巢癌细胞SKOV3,按不同处理因素分组。SKOV3-Beclinl组：Beclinl过表达组(转染重组载体pcDNA3.1/Beclinl); SKOV3-pcDNA31组：Beclinl过表达组对照组(转染空白载体pcDNA3.1); SKOV3-siRNA组：Beclinl降表达组(转染siRNA干扰探针)；SKOV3-RNAiMAX组：Beclinl降表达组对照组(转染siRNA的转染试剂RNAiMAX);对照组：SKOV3细胞组(未处理SKOV3)。通过荧光定量PCR检测Beclinl在五组中的表达。然后通过基因芯片技术和荧光差异双向电泳-质谱技术检测出SKOV3-Beclinl组、SKOV3-siRNA组和对照组中mRNA和蛋白质的表达变化。1、 Beclinl基因的siRNA探针、过表达载体转染卵巢癌SKOV3细胞后,荧光定量PCR检测,结果显示转染后SKOV3-Beclinl组中Beclinl的相对拷贝量明显增高,SKOV3-siRNA组中Beclinl的相对拷贝量明显降低,说明转染成功,成功实现了Beclinl基因在SKOV3细胞中的表达变化,并且后续的实验表明Beclinl在mRNA水平和蛋白水平都发生了相应的变化。2、通过基因芯片技术检测出5110个在mRNA表达水平发生变化的基因,其中18个基因在蛋白水平发生表达变化,分别是PTPRK、 AMIG02、 PDIA3、 SCAMC、 MSN、 SAG、 ANXA3、 ANXA5、 ERP29、 GSTPl、 PCK2、 MVP、 PRDX4、 TDPX、 BECNl、 SOD2、 STX5、ZNF929.Beclinl基因干预SKOV3后,通过荧光差异双向电泳-质谱实验检出了32个表达水平发生变化蛋白,分别是线粒体乙醛脱氢酶、两性蛋白诱导蛋白、膜联蛋白A3、膜联蛋白A5、钙依赖线粒体载体蛋白、DOCK蛋白、内质网蛋白29、线粒体烯脂酰辅酶A水解酶、beclinl蛋白、线粒体谷氨酰胺肾异构体、谷胱甘肽S-转移酶、缺氧上调蛋白1、人主要穹窿蛋白、线粒体甲基丙二酸辅酶A差向异构酶、膜突蛋白、肌球蛋白、线粒体泛醌Fe-S蛋白、线粒体NADH-泛醌氧化还原酶75KDa亚组、过氧化还原蛋白4、线粒体三磷酸鸟苷、蛋白质二硫键异构酶A3、mRNA前体加工因子19、受体型蛋白络氨酸磷酸酶K,视网膜色素变性1-样1蛋白、s-抑制蛋白、锰超氧化物岐化酶、突触融合蛋白5、线粒体硫氧还原蛋白依赖性过氧化物还原酶、锌指蛋白292。结论1、筛选出在mRNA表达水平发生变化的基因5110个；表达水平变化的蛋白32个,其中的18个蛋白同时在mRNA水平发生相应的变化。分别是受体型蛋白络氨酸磷酸酶k、两性蛋白诱导蛋白2、蛋白质二硫键异构酶A3、钙依赖线粒体载体蛋白、膜突蛋白、s-抑制蛋白、膜联蛋白A3、膜联蛋白A5、内质网蛋白29、谷胱甘肽S-转移酶、线粒体三磷酸鸟苷、人主要穹窿蛋白、过氧化还原蛋白4、线粒体硫氧还原蛋白依赖性过氧化物还原酶、beclinl蛋白、锰超氧化物岐化酶、突触融合蛋白5、、锌指蛋白292。