论文部分内容阅读
目的:探讨广西特产金花茶（Camellia chrysantha （Hu） Tuyama,CCT）及银杏叶（Ginkgo Biloba leaves,GBL）对DEN诱导大鼠肝脏癌前病变的影响及CCT在体外对肝癌细胞生长增殖的影响并初步探讨其作用机制。方法:1、动物试验取121只6周龄雄性Wistar大鼠,采用随机分组法将大鼠分为五组:A组:金花茶茶花组（20只）,B组:金花茶茶叶组（20只）,C组:金花茶浓缩液组（20只）,D组:银杏叶组（20只）,E组:DEN对照组（41只）。开始实验后A、B、C、D组大鼠分别连续给不同受试物三周。两周后所有各组大鼠被腹腔注射二乙基亚硝胺（Diethylmitrosamine, DEN）1剂（200mg/kg.bw）,2周后饲以含0.015%二乙基氨基芴（2-acetylaminofluorene , 2-AAF）的饲料2周,并于饲此饲料的第7天行肝脏大部分（2/3）切除术。停用2-AAF饲料后第3天处死所有动物,每只动物取五块肝组织做γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）组化染色,观察并统计每个γ-GT阳性灶的面积（mm2/个）、单位面积灶的个数（个/cm2）、单位面积灶的总面积（mm2/cm2）。2、肿瘤细胞培养的体外试验用RPMI1640培养基（内含100IU/ml青霉素、100ug/ml链霉素和10%小牛血清）培养BEL-7404人肝癌细胞株,和正常人肝细胞7702,细胞在5%CO2、37℃条件下贴壁生长,每隔3～4天传代1次。采用噻唑兰（MTT）法测定半数抑制率浓度(IC50),观察受试物对肝癌细胞和正常人肝细胞有无抑制作用。采用HE染色和吖啶橙荧光染色方法观察在IC50时金花茶浸泡液及浓缩液处理的肝癌细胞与未经受试物处理的肝癌