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苹果树腐烂病是我国苹果产区发生普遍的一种病害,该病害是由valsa mali引起的。发生严重时,可造成毁园。目前,防治苹果树腐烂病多采用化学农药防治为主,其不仅污染环境,而且引起病原菌产生抗药性等问题。因此,采用生物防治以及开发高效、低毒的生物制剂,成为当下防治苹果树腐烂病的研究热点。本试验以前期室内先筛选出一株对苹果树腐烂病有较好防效的生防放线菌为试验材料,对其进行耐药菌株的微波诱变选育和生防制剂研制,并对其生防制剂防效和质量标准进行了测定。所取得的研究结果如下:1.对放线菌ZZ-9菌株进行不同时间的微波诱变处理。结果表明,在微波辐照15-60 s条件下,获得4株耐70μg/mL甲基硫菌灵的突变菌株ZZ-9A、ZZ-9B、ZZ-9C和ZZ-9D。通过对4株突变菌株进行抑菌率和传代稳定性测定,筛选出一株抑菌率较好且传代稳定的突变菌株ZZ-9B。菌株ZZ-9B与70μg/m L甲基硫菌灵协同作用测定表明,当菌株ZZ-9B与甲基硫菌灵配比为8:2时,在离体枝条上对苹果树腐烂病的协同防效为89.42%,明显高于突变菌株和甲基硫菌灵单独使用时的防效。2.采用菌丝生长速率法对不同类型的表面活性剂、防腐剂、紫外保护剂、渗透剂和载体在不同浓度下对放线菌ZZ-9菌株生长及其抑菌活性进行了测定。助剂筛选结果表明:ZZ-9生防制剂各助剂分别为1%吐温-80、1.5%硫酸链霉素、1.5%木质素磺酸钠、0.1%三氧硅烷时,对苹果树腐烂病菌的抑制率均达80%以上,显著高于对照。同时,利用响应面法对ZZ-9生防制剂的最佳助剂条件进行了优化,确定其最佳助剂浓度为:60 m L活菌发酵液中分别加入594μL吐温-80、912 mg硫酸链霉素、894 mg木质素磺酸钠及66μL三氧硅烷在此条件下,ZZ-9菌剂对苹果树腐烂病菌的抑制率最高,达86.51%。载体筛选结果表明,2.0%的黄原胶使ZZ-9制剂呈稠黏液,附着性强,为最佳载体。3.对ZZ-9涂抹剂进行防效评价及质量标准检测,结果表明,ZZ-9涂抹剂对苹果树腐烂病病原菌的抑制率为89.54%;在离体枝条保护作用试验中,ZZ-9涂抹剂处理后,病疤平均面积为101.72 mm~2,显著低于对照,防效为83.61%;在离体枝条治疗作用试验中,ZZ-9涂抹剂处理后,病疤平均面积为154.77 mm~2,显著低于对照,与甲硫·萘乙酸相差52.30 mm~2;治疗效果为73.13%。ZZ-9涂抹剂呈黑褐色粘稠状液体,流动性差,成膜性好,且厚度适中,在苹果枝条或树干上有较好的附着性,pH为5.65;有效活菌数为12.12×10~7cfu/mL;在(50±2)℃、(-4±2)℃以及紫外灯照射条加下,其活菌数与抑菌率均有一定程度下降,但仍正常条件差异不大;随着时间的增长,ZZ-9涂抹剂的杂菌数基本保持稳定,均低于1.30×10~6cfu/m L,且其在120 d,仍能保持较好防效。