目的:分析急性髓系白血病（AML）患者外周血T细胞免疫球蛋白域和免疫受体酪氨酸抑制基序蛋白（TIGIT）、CD226和NKG2D+γδT细胞亚群的表达分布特点与临床转归的关系,并初步通过免疫干预手段调控TIGIT分子在γδT细胞中的表达,分析其功能改变情况,为进一步研发AML新的细胞免疫治疗策略提供基础研究资料。方法:采集26例AML初发（AML-de novo）患者以及14例获得临床完全缓解（AML-CR）患者的外周血样,同时采集20例健康人（HI）外周血作为对照。流式细胞术检测外周血γδT细亚群的表达比例,分析其与临床转归的相关性。利用不同培养体系体外扩增外周血γδT细胞,检测其对白血病细胞株的杀伤功能。使用TIGIT的小干扰RNA（si-TIGIT）下调γδT细胞中TIGIT分子的表达,并分析免疫干预前后γδT细胞功能的改变情况。结果:（1）AML-de novo组、AML-CR组及HI组外周血CD3+T细胞、CD3+γδT细胞和Vδ2+γδT细胞的表达比例呈现HI组>CR组>de novo组的表达模式,而Vδ1+γδT细胞的表达比例则呈现为de novo组>CR组>HI组的情况。（2）AML-de novo组患者外周血CD3+T细胞、CD3+γδT细胞、Vδ1+γδT细胞和Vδ2+γδT细胞中TIGIT的表达比例均显著高于HI组;且随访8例初发AML患者获得缓解后,在总γδT细胞和Vδ2+γδT细胞亚群中TIGIT的表达比例显著下降。（3）AML-de novo组和AML-CR组的γδT细胞、Vδ1+γδT细胞和Vδ2+γδT亚群中CD226+的表达比例均显著低于HI组;AML-de novo组的CD3+T细胞和γδT细胞中NKG2D+的表达比例低于HI组。外周血CD226+NKG2D+γδT细胞、CD226+NKG2D-γδT细胞、CD226-NKG2D-γδT细胞亚群表达比例呈现出HI组>CR组>de novo组的表达模式,且AML-de novo组γδT细胞亚群的CD226+NKG2D+共表达比例显著低于HI组;而CD226-NKG2D+γδT细胞亚群表达比例呈现出CR组>de novo组>HI组的模式。（4）外周血TIGIT+CD226+γδT细胞及TIGIT+CD226-γδT细胞亚群表达比例均呈现出de novo组>CR组>HI组的表达模式;而TIGIT-CD226+γδT细胞及TIGIT-CD226-γδT细胞亚群表达比例则呈现HI组>CR组>de novo组的模式;AML-de novo组和AML-CR组的TIGIT+NKG2D+γδT细胞及TIGIT+NKG2D-γδT细胞亚群表达比例均显著高于HI组,但TIGIT-NKG2D+γδT细胞亚群表达比例显著低于HI组。（5）AML-de novo组CD3+T细胞、γδT细胞和Vδ1+γδT细胞亚群的Foxp3+表达比例显著高于HI组;AML-de novo组和AML-CR组的总γδT细胞及Vδ2+γδT细胞亚群中TIGIT+Foxp3+的表达比例均显著高于HI组。（6）AML-de novo组γδT细胞的IFN-γ和TNF-α表达均显著低于HI组。（7）结合患者临床疗效评价发现,TIGIT-CD226+γδT细胞亚群表达比例高的患者发生未缓解的风险低。（8）我们还对γδT细胞的体外培养体系进行了优化,使用不同培养体系（包括联合使用TCRγδ单克隆抗体和NKG2D单克隆抗体体系、单纯使用TCRγδ单克隆抗体体系以及含唑来膦酸（Zol）体系）扩增γδT细胞,发现扩增效果以联合使用TCRγδ单克隆抗体和NKG2D单克隆抗体体系最佳,其次为单纯使用TCRγδ单克隆抗体体系,再次为含Zol体系;培养体系优化后CD3+γδT细胞的纯度>90%;不同体系扩增的γδT细胞均可对白血病细胞株产生一定的杀伤效应。（9）初步使用si-TIGIT下调γδT细胞中TIGIT分子的表达,发现TIGIT-si RNA组的γδT细胞的杀伤效应与空白对照组相比有改善的趋势。结论:AML患者外周血的TIGIT耗竭性γδT细胞亚群表达比例增多,且CD226和NKG2D在γδT细胞上的表达比例减少,Foxp3+在γδT细胞上的表达比例增多。TIGIT相关免疫分子在γδT细胞上的表达失衡与AML的预后相关,TIGITCD226+γδT细胞亚群表达比例高的患者发生未缓解的风险低。联合使用TCRγδ单克隆抗体和NKG2D单克隆抗体的培养体系能够获得体外培养γδT细胞的最佳扩增效果。使用si-TIGIT下调γδT细胞中TIGIT分子的表达,γδT细胞的杀伤功能在一定程度上有改善的趋势。