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【研究背景与目的】 脑组织内神经元的大量损伤与丢失是阿尔兹海默病（AD）等神经变性疾病的重要病理特征，研究表明，ox-LDL通过促进神经细胞的损伤与凋亡机制参与AD等神经变性疾病的病理进程。然而，ox-LDL损伤神经细胞的机制目前尚未阐明。 本研究分别使用不同浓度的ox-LDL孵育体外培养的HT22小鼠海马神经元，使用Toll样受体4（toll-likereceptor4 TLR4）的特异性抑制剂TAK-242或者核转录因子卡帕B（Nuclear factor- kappa B，NF-κB）的抑制剂PDTC分别干预，以阻断TLR4信号途径，明确ox-LDL对HT22神经元细胞的损伤作用，探讨ox-LDL所诱导的HT22细胞损伤与凋亡是否通过TLR4介导的PI3K/AKT-NF-κB信号转导途径。以期揭示ox-LDL致HT22细胞的毒性作用及分子生物学机制。 【方法】拟用不同浓度ox-LDL分别处理HT22细胞24 h，以CCK-8试剂盒检测其细胞活力，Annexin V/ PI双染流式细胞术检测细胞凋亡，Western blotting法检测HT22细胞中TLR4，磷酸化AKT、NF-κB p65、凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax及IL-1β含量，透射电镜下观察ox-LDL对HT22细胞超微结构改变的影响；Western blotting法检测HT22细胞的含量。探讨ox-LDL对HT22小鼠海马神经元损伤、凋亡与TLR4/PI3K/AKT-NF-κB信号途径途径的影响。分别使用TAK-242，PDTC或者PI3K的抑制剂LY294002预先孵育HT22神经细胞0.5 h，再以100μg/ml的ox-LDL共同孵育HT22细胞24 h，以CCK-8试剂盒检测HT22细胞活力，流式细胞术评价HT22细胞凋亡率的变化，Western blotting法检测分析HT22细胞TLR4、p-AKT、p-NF-κB p65、凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax及IL-1β的表达。观察阻断TLR4-PI3K/AKT-NF-κB信号途径后ox-LDL对HT22神经元的损伤作用，探讨ox-LDL是否通过TLR4介导的PI3K-Akt/NF-κB信号途径促进HT22细胞的损伤与凋亡。 【结果】 CCk-8的检测结果发现，与对照组相比较，高浓度ox-LDL（100μg/ml）处理组HT22的细胞活力显著降低，且HT22细胞的活力下降及HT22细胞的凋亡率增加与ox-LDL的浓度升高成正相关；Western blotting检测结果显示，与对照组相比较，高浓度ox-LDL处理组HT22细胞TLR4，p-AKT，p-NF-κB p65及凋亡相关蛋白Bax等的表达显著增加，而抗凋亡因子Bcl-2的表达则明显减少。光学倒置显微镜下发现，与对照组相比较，高浓度ox-LDL处理组HT22细胞的形态学表现出明显的损伤与凋亡特征（其胞体的折光性明显减低，轴突、树突数量减少、断裂。透射电镜观察结果表明，100μg/ml ox-LDL组HT22细胞的超微结构被破坏，呈现凋亡形态的HT22海马神经细胞数量显著增加。与100μg/ml ox-LDL组HT22细胞相比较，TLR4的抑制剂（TAK-242），NF-κB的抑制剂（PDTC）与PI3K抑制剂（LY294002）处理组 HT22细胞凋亡率显著降低，且TLR4，p-PI3K、p-AKT，p-NF-κB p65及凋亡相关蛋白Bax的表达量明显降低，其IL-1β水平显著降低，而Bcl-2的表达明显升高。 【结论】 ox-LDL通过激活HT22细胞TLR4介导的PI3K/AKT-NF-κB信号途径促进HT22细胞损伤与凋亡。