该文应用反相键合高效液相干色谱对氨基酸和小肽的定量的分析方法进行了研究.选取FMOC-Cl、FMOC-OSU、DNS-Cl作为氨基酸和小肽的柱前衍生试齐,对衍生反应进行了系统的实验研究.从各衍生试剂的用量、衍生缓冲体系的PH值、衍生时间对衍生反应的影响以及衍生产物的稳定性等几方面对衍生试剂进行了综合考察.结果表明FMOC-Cl作为氨基本和小肽的柱前衍生试剂,衍生反应迅速、安全、衍生环境的改变对反应影响较小、衍生产物稳定,过量的衍生试剂可通过和疏水性的胺反应不干扰分离.是一种选择性较好,灵敏度高,衍生反应操作简单的衍生试剂,适用用于对氨基酸和小肽进行定量分析.对所用的液相色谱仪的各项参烽进行了校正.用标准曲线法和绝对分析法对氨基酸混合溶液分别进行定量,发现两种方法定量结果基本一致,进一步验证了绝对分析法法的可靠性.初步建立了以FMOC-Cl为柱前衍生试齐,在反相高效液相色谱上分离氨基酸和小肽并以绝对分析法定量的方法.选择牛血清蛋白、牛胰岛不比和马肌红蛋白等3种已知氨基酸组成的蛋白质,分别以不同的水解保护剂(即抗氧化剂)在不同温度和水解时间下对蛋白质的水解行为进行研究.测定了植物叶片提取液的氨基酸的组成.