【摘 要】
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MYB转录因子是植物中最大转录因子家族成员之一,在细胞周期、生理代谢平衡、胁迫应答等生命活动中起着重要作用。前期研究结果表明软核山楂果实中CpMYB5基因转录水平比硬核山
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MYB转录因子是植物中最大转录因子家族成员之一,在细胞周期、生理代谢平衡、胁迫应答等生命活动中起着重要作用。前期研究结果表明软核山楂果实中CpMYB5基因转录水平比硬核山楂中转录水平显著下调,且CpMYB5与苹果MdMYB5高度同源。由于山楂难以遗传转化,所以本研究首先揭示苹果MdMYB5基因的功能,从而为今后揭示CpMYB5的功能奠定基础。主要研究结果如下:1.从‘GL-3’苹果叶片cDNA中克隆得到MdMYB5基因编码区全长序列(1092 bp),生物学分析发现:苹果MdMYB5与山楂及拟南芥的MYB转录因子亲缘关系较近,属于R2R3MYB类转录因子。2.对MdMYB5基因的启动子序列进行分析,发现具有MYB46转录因子识别的特异序列M46RE和SMRE,通过EMSA及转录活性分析实验表明MdMYB46通过直接绑定MdMYB5启动子对其进行转录调控。3.以植物表达载体pRI 101 AN为基础,将pKANNIBAL沉默载体中INTRON片段整合到pRI 101 AN载体上,构建一种新的植物沉默载体pRNAi-E载体。构建MdMYB5基因沉默载体pRNAi-E-MdMYB5,利用农杆菌介导的叶盘转化法转化‘GL-3’,获得MdMYB5沉默表达株系。对转基因植株进行盐胁迫和模拟干旱胁迫处理,通过观察植株生长状态和组织化学染色实验表明MdMYB5参与植物的逆境胁迫应答。
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