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目的:通过试验验证甲连盆腔胶囊对盆腔炎性疾病后遗症(Sequelae of pelvic inflammatory disease,SPID)抗炎作用的有效性,并从高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1 protein,HMGB-1)与Toll样受体/核因子kappa B(Toll-like receptors/nuclear factor kappa-B,TLRs/NF-κB)信号通路的相互作用探讨甲连盆腔胶囊治疗SPID的可能机制。方法:选取雌性未孕SD大鼠90只,随机抽取12只为空白组(Con组),12只为假手术组(Sham组),Con组不做处理,Sham组仅开关腹,剩余大鼠均采用苯酚胶浆法建立SPID模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组(SPID组),甲连盆腔胶囊低、中、高剂量组(L+SPID组、M+SPID组、H+SPID组)以及妇科千金胶囊组(A+SPID组),每组12只。L+SPID、M+SPID、H+SPID组分别给予浓度为20、40、80mg/ml的甲连盆腔胶囊混悬液18.75 ml/kg·d,A+SPID组予以40 mg/ml的妇科千金胶囊混悬液6.25ml/kg·d灌胃,其余大鼠予蒸馏水灌胃,连续干预21d。肉眼观察大鼠一般情况,盆腔炎症情况及子宫形态;HE染色观察子宫病理改变;ELISA检测大鼠子宫HMGB-1、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平;免疫组化法(IHC)检测子宫组织Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation primary response gene 88,MyD88)、NF-κB p65的平均光密度;蛋白质印迹法(western blot,WB)检测TLR2、TLR4、MyD88、磷酸化NF-κB/p65(phosphorylation of NF kappa B/p65,p-NF-κB p65)的蛋白水平。结果:1 SPID模型验证:肉眼观察盆腔充血、积液或积脓、组织粘连;子宫质地较硬,形态不规则,宫腔扩张或粘连狭窄;HE染色镜检见子宫层次紊乱,腔壁结构破坏,内膜充血水肿,上皮细胞变性坏死,腺体扩张或消失,大量炎性细胞浸润,即为造模成功。2大鼠一般情况:Con组、Sham组大鼠各项生理功能正常;SPID模型大鼠毛发暗淡,精神烦躁,眼角分泌物增多,弓背、蜷缩、扎堆,饮食减少,尿血,阴道分泌物增多,大便不成型。各干预组给予相应药物治疗后各项生理表现好转,以H+SPID组最明显。3形态学改变:盆腔情况:Con组与Sham组大鼠盆腔层次清晰;SPID组较模型验证时盆腔结缔组织增厚;各治疗组盆腔炎症表现减轻;以H+SPID组显著。盆腔粘连程度评分:与Con组和Sham组比较,SPID组大鼠盆腔粘连严重(P<0.001);与SPID组对比,各治疗组盆腔粘连程度减轻(P<0.05),H+SPID组效果最佳(P<0.001)。子宫形态:肉眼观察Con组及Sham组子宫形态规则,质地柔韧,宫腔通畅;SPID模型大鼠子宫形态改变同前,各干预组子宫炎症损害较SPID减轻,以H+SPID组最明显。子宫病理形态:HE染色光镜下观察Con组和Sham组大鼠子宫结构完整,层次分明,无明显炎性细胞浸润;SPID组子宫较模型验证时慢性炎症细胞浸润和成纤维细胞增生增多,余病理表现同前;H+SPID组子宫结构层次基本清晰,腔壁完整,少量炎性细胞浸润,腺体基本完整,平滑肌排列较整齐;M+SPID组次之;L+SPID与A+SPID组子宫病理表现相当。子宫病理评分:与Con组和Sham组比较,SPID组评分明显增高(P<0.001);与SPID组比较,各治疗组子宫病理评分均有效降低(P<0.05)。4大鼠子宫组织HMGB-1、IL-6、TNF-α和IL-10水平:与Con组及Sham比较,SPID组HMGB-1、IL-6、TNF-α水平升高,而IL-10水平降低,差异有统计学意义(P<0.001);各干预组HMGB-1及IL-6、TNF-α降低,IL-10水平增加,差异具有统计学意义(P<0.05),尤以H+SPID明显(P<0.001)。5大鼠子宫TLR/4-NF-κB通路相关蛋白表达:与Con组和Sham组比较,SPID组大鼠子宫TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB p65、p-NF-κB p65表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.001);与SPID组比较,各治疗组上述蛋白表达降低,H+SPID组最显著,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1苯酚胶浆法建立大鼠SPID模型证实可靠。2 HMGB-1、TLR2、TLR 4、MyD88、NF-κB可能参与了大鼠SPID发病过程。3甲连盆腔胶囊可有效控制SPID模型大鼠炎症反应,调节细胞因子,减轻子宫炎症病理损伤,且疗效存在剂量依赖性。4甲连盆腔胶囊治疗大鼠SPID的机制可能是通过减少内源性炎症因子HMGB-1的释放,抑制TLR2/4-NF-κB信号通路激活,下调炎症因子IL-6、TNF-α水平,促进抑炎因子IL-10分泌,从而减轻炎症反应。5甲连盆腔胶囊对SPID模型大鼠抗炎效果与妇科千金胶囊相当,临床可作为同类药品推广。