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背景和目的脑梗死是脑血管疾病中较为常见的一种表现形式,包括缺血性脑梗死和出血性脑梗死两种类型,前者较常见,约占脑梗死患者的85%,致死率高,且大多数患者后期会出现不同程度后遗症,严重影响了患者的生活质量和家庭幸福。随着临床治疗水平的提高,脑梗死的临床治疗手段更趋全面化,近年来,对于脑梗死后其远隔区域继发的神经损伤及功能代谢异常的干预和治疗引起了更广泛的关注。神经机能联系不能(diaschisis)学说的提出,解释了许多脑梗死后远隔区域所出现的组织结构、功能代谢、电生理活动异常的临床症状,越来越多的研究者依靠更加先进的电生理、病理及影像技术,对神经机能联系不能的发生原因及发展机制进行了更深一步的研究,更加聚焦关注脑梗死发生后,通过对神经联系不能产生通路或介导因子的人为干预,来缓解梗死原发灶对周围及远隔区域结构功能的影响,为神经功能网络的恢复提供了更高效的治疗途径和新方法。排斥性导向分子b(RGMb)是一种重要的轴突生长抑制剂,在中枢神经系统中发挥着抑制轴突再生和重塑的作用,体外实验研究表明,脑梗死发生后RGMb表达量增加,直接参与了梗死区域及与之有神经元联系基础的远隔区域的神经元变性、凋亡等过程,有相关研究表明,RGMb参与介导了神经机能联系不能的产生,因此,RGMb是一种具有巨大潜力的神经元再生抑制性蛋白,临床上通过对其靶向干预,从而对脑梗死或其它中枢神经损伤后神经功能网络的调控有着非常大的临床价值。磁共振扩散峰度成像(DKI)是一种基于水分子运动测量的非侵入性磁共振成像技术,是在扩散加权成像(DWI)和扩散张量成像(DTI)的基础上扩展为可以研究非高斯分布水扩散模型的先进技术,相比于DTI,其增加的峰度值对复杂结构细微组织的观察更敏感。本研究采用DKI技术通过对缺血性脑梗死大鼠的梗死核心区及双侧小脑半球影像参数变化的检测,证明脑梗死后神经机能联系不能现象的存在,并结合病理及免疫组化探讨该现象产生的原因及改善途径,为临床治疗途径的改善提供更加值得信赖的依据。材料与方法1、将144只SD大鼠随机分为A组(假手术组,不插入线栓)、B组(MCAO组,即模型组)、C组(阴性对照组,MCAO模型制作后定向性植入空载腺病毒)、D组(干预组,MCAO模型制作后定向植入重组腺病毒Adv-RGMb-siR)四组:A组共12只、B组60只(分6h、12h、24h、48h、3d共5个时间点,每个时间点12只)、C组36只(分12h、24h、48h共3个时间点的亚组,每个亚组12只)、D组36只(同样分12h、24h、48h共3个时间点的亚组,每个亚组12 只);2、对A、B、C、D四组大鼠进行神经功能评分及磁共振扫描(序列包括T1WI、T2WI、DWI、DKI),并对DKI图像后处理,取得梗死核心区(左侧基底节区)、双侧小脑半球的MK图和MD图,处理并记录参数;3、每组大鼠各时间点分别取6只制作大脑标本,用以HE染色和免疫组化,测量梗死核心区(左侧基底节区)、双侧小脑半球RGMb蛋白的表达。4、采用SPSS 21.0统计学软件,两两对比采用独立样本t检验或Mann-Whitney U;多组样本相比较可采用单因素方差分析或Kruskal-Wallis秩和检验。多组之间多重比较用LSD-t检验或Bonferroni检验。认为P<0.05差异则有统计学意义。结果1、MCAO组6h、12h、24h、48h、3d核心梗死区及双侧小脑半球的MK值均高于对照组,于12h最高;MD值均低于对照组,于12h最低(P<0.05);2、MCAO组6h、12h、24h、48h、3d对侧小脑半球的MK值均高于同侧小脑半球,MD值均低于同侧小脑半球(P<0.05);3、RNAi干预组12h、24h、48h核心梗死区MK值均低于MCAO组,干预组24h、48h核心梗死区的MD值高于MCAO组(P<0.05);MCAO组与阴性对照组相比,MK值、MD值差异无统计学意义;4、RNAi干预组24h、48h对侧小脑半球MK值低于MCAO组,且低于同侧小脑半球的MK值(P<0.05);5、MCAO组核心梗死区(6h、12h、24h、48h、3d)、双侧小脑半球(12h、24h、48h、3d)的RGMb表达均高于对照组(P<0.05);双侧小脑半球对比,对侧小脑半球(12h、24h、48h、3d)的RGMb表达高于同侧小脑半球(P<0.05);6、RNAi干预组核心梗死区及对侧小脑半球(12h、24h、48h)、同侧小脑半球(24h、48h)的RGMb表达均低于MCAO组,对侧小脑半球的RGMb表达高于同侧小脑半球(P<0.05);7、RNAi干预前后MK值、MD值变化率:差异有统计学意义的亚组对比中,MK值的变化率高于MD值。结论1、DKI可以用于检测交叉性小脑神经机能联系不能现象,且MK值对检测脑梗死后神经机能联系不能现象较MD值更敏感;2、排斥性导向分子b的表达水平的改变可以提示交叉性小脑神经机能联系不能现象的存在;3、给予RGMb特异性RNAi干预治疗后,梗死核心区及对侧小脑RGMb表达降低,MK值降低、MD值升高,说明该治疗方法对脑梗死后神经机能联系不能有积极的治疗意义。