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目的:评价肝宝胶囊对胆管结扎(BDL)大鼠肝纤维化模型的防治作用,并探讨其作用机理;评价肝宝胶囊的一般药理学试验,为临床研究和安全用药提供信息。方法:(1)雌性SD大鼠,假手术组仅游离肝门部胆总管,其它各组以胆管结扎的方法制备大鼠胆汁淤积性肝纤维化模型。恢复性饲养5d后随机分为假手术组、模型组,肝宝胶囊1.0、2.0、4.0原生药g·kg-1,双环醇0.1g·kg-1,水飞蓟素胶囊0.1g·kg-1。在随后的4周内,每天灌胃给药1次,假手术组和模型组给予等体积空白溶剂。末次给药后24小时,取肝脏、脾脏称湿重并计算其脏器指数;分离血清一份用全自动血液生化分析仪测定其:丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性以及总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP);另一份运用酶联免疫吸附法测定:透明质酸(HA)、大鼠Ⅲ型前胶原肽(ⅢPC)和层粘蛋白(LN)水平;肝损伤指标,取肝脏测定羟脯氨酸(HyP)含量;光镜下用HE染色的方法观察肝脏形态结构及纤维化程度,用Masson染色的方法观察肝脏组织内胶原纤维堆积情况;免疫组化的方法测定α-SMA的表达;取肝组织运用ELISA方法检测:Smad4、Smad7、PDGF-BB、IFN-γ及TGFβ1;利用多功能液相芯片蛋白技术测定肝脏组织中 IL-10、IL-13、IL-12p70、IL-4、IL-6、IL-12、IL-18、IL-1 α、IL-1 β、MCP-1、MIP-1 α、MIP-2、TNF-α 等细胞因子水平及 P-CREB、P-JNK、P-NF-κB、P-P38、P-ERK1/2、P-Akt、P-p70S6K、P-STAT3 及P-STAT5等信号通路因子。(2)用戊巴比妥钠35 mg·kg-1对健康比格犬进行麻醉,肝宝胶囊各剂量组进行十二指肠给药,手术完成后,开启十六道生理记录仪,观察并记录给药前后血压、心电、呼吸的波动情况。同时进行肝宝胶囊对小鼠自发活动、转棒运动、戊巴比妥钠阈下剂量催眠的协同作用和阈剂量致小鼠睡眠时间的影响作用。结果:(1)胆管结扎大鼠在造模4周后,其血清ALT、AST、TBIL、DBIL、y-GT、ALP含量明显升高,A/G、ALB明显降低,肝脏指数显著增加,肝脏组织羟脯氨酸(Hyp)、胶原堆积及α-SMA表达明显增加,肝脏IL-18、MIP-1α及TGF-β1表达增多,p70S6K蛋白磷酸化水平升高;IL-1α、IL-4、IL-10、TNF-α、Smad4 含量降低,NF-κB、P38、Akt 及 STAT5蛋白磷酸化水平降低,镜下HE染色,肝脏出现明显的纤维化,与假手术组比较差异均有统计学意义。肝宝胶囊1.0原生药g.kg-1可显著降低胆管结扎大鼠血清AST、ALT、TBIL、DBIL、γ-GT、ALP活性,升高其血清ALB水平及A/G比值,降低其肝脏组织Hyp、IL-18及TGF-β1含量,升高IL-1α含量。肝宝胶囊2.0原生药g·kg-1可显著降低胆管结扎大鼠血清AST、ALT、TBIL、DBIL、γ-GT、ALP活性,升高其血清ALB水平及A/G比值,可显著降低肝脏组织Hyp、TGF-β1含量及p70S6K蛋白磷酸化水平,升高其IL-4、TNF-α含量及NF-κB、P38、Akt、STAT5蛋白磷酸化水平。肝宝胶囊4.0原生药g·kg-1可显著降低胆管结扎大鼠血清AST、ALT、TBIL、DBIL、γ-GT、ALP水平,升高其血清ALB水平及A/G比值,降低肝脏组织Hyp、MIP-1α、IL-18、IL-6 及 TGF-β1 含量,升高其 IL-1α、TNF-α、IL-13、PDGF-BB含量及P38、STAT5蛋白磷酸化水平。镜下,HE染色,肝宝胶囊2.0g·kg-1 4.0g·kg-1可改变BDL大鼠的纤维化程度,与模型组比较差异有统计学意义;Masson染色,肝宝胶囊各剂量组均可显著减少BDL大鼠肝脏组织的胶原纤维面积、平均密度等指标,与模型组比较显著改善;给予肝宝胶囊治疗后,活化的HSC明显减少,与模型组比较,肝宝胶囊各剂量组,均能显著降低BDL大鼠肝脏组织α-SMA的表达。(2)给予肝宝胶囊后比格犬无流涎、肌颤及瞳孔变化等现象,其血压、心电图及心率,呼吸频率及呼吸深度均无明显变化;肝宝胶囊对小鼠的自发活动有抑制作用,与戊巴比妥钠阈下剂量致小鼠催眠有协同作用,对小鼠转棒运动和与戊巴比妥钠阈剂量致小鼠睡眠时间无影响。结论:肝宝胶囊对胆管结扎致大鼠肝纤维化有较好的防治效果,其机制可能是通过显著降低大鼠肝脏组织中的IL-18、TGF-β1、MIP-1α表达及p70S6K蛋白磷酸化水平等,抑制HSCs的活化和增殖,减少ECM的合成;来减轻动物肝纤维化的病变程度。肝宝胶囊9 g·kg-1体重给药剂量范围内对比格犬的心血管系统及呼吸系统均无影响;肝宝胶囊26 g·kg-1体重给药剂量范围对小鼠的中枢神经系统存在一定的影响作用。