【摘 要】
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昆虫杆状病毒表达系统是80年代发展起来的真核表达系统，它具备所有真核系统翻译后加工功能，如二硫键的形成，糖基化，磷酸化，信号肽切除等。它不但能表达大分子蛋白还可以同时表达多
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昆虫杆状病毒表达系统是80年代发展起来的真核表达系统，它具备所有真核系统翻译后加工功能，如二硫键的形成，糖基化，磷酸化，信号肽切除等。它不但能表达大分子蛋白还可以同时表达多个外源基因，形成多聚体蛋白。表达出的重组蛋白具有天然蛋白的生物学功能。由于多角体蛋白在病毒总蛋白中的含量非常高，利用它的强启动子构建的表达载体，使表达的外源目的蛋白最高可达细胞总蛋白量的50％。 本研究采用昆虫杆状病毒表达系统表达hBMP2和3。首先将hBMP2和hBMP3的全长cDNA编码区克隆入转移载体Bacpk8，酶切鉴定正确后，大量制备高纯度重组质粒。利用脂质体包裹转移载体和病毒DNA，并转染昆虫细胞，4-5天后收集转染上清，作空斑实验筛选并纯化单个重组病毒。空斑形成后，经X-gal染色，挑取白色的单个重组克隆保存，取B2和B3各5个白色克隆进行第一轮扩增，收集病毒上清。空斑实验检测pfu，B3克隆的
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