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背景:葡萄糖作为一种能量物质,已广泛用于细胞培养之中。但培养胚胎时,却对哺乳动物胚胎早期发育有抑制作用,晚期有促进作用。对其抑制机理,至今还尚未完全阐明。 目的与方法:本实验以昆明小鼠的早期胚胎为研究对象,以 mCZB培养液为基础液,通过添加不同浓度的葡萄糖以及测定胚胎内外活性氧的含量来初步探讨葡萄糖对胚胎的抑制原因。 结果与分析:1.在用不同浓度葡萄糖培养小鼠1-细胞期胚胎的实验中,15 mM葡萄糖组囊胚发育率(51.25%)均显著低于(P<0.05)对照组(78.26%)、5 mM(68.00%)和10 mM葡萄糖组(62.00%),而对照组、5 mM和10 mM葡萄糖组三者之间均差异不显著(P<0.05);2.在15 mM葡萄糖对不同发育阶段胚胎内部的O2—。含量影响的实验中,15 mM葡萄糖组中2-细胞晚期胚胎内 O2—。相对含量值(63.67)显著(P<0.05)高于与本组中2-细胞早期(22.02)、4-细胞中期(27.06)。与对照组相比,15 mM葡萄糖组中2-细胞晚期胚胎内 O2—。相对含量值也显著(P<0.05)升高(15 mM葡萄糖组:63.67 vs对照组:55.38),而处于2-cell早期和4-cell中期阶段的各组之间差异不显著(15 mM葡萄糖组:22.02 vs对照组:18.38和27.06 vs27.95,P<0.05);3.在15 mM葡萄糖对不同发育阶段胚胎内部的H2O2含量影响的实验中,在2-细胞早期,15 mM葡萄糖组 H2O2相对含量(15.53)显著(P<0.05)低于对照组(27.84)。而处于2-细胞晚期和4-细胞中期阶段的各组之间均差异不显著(15 mM葡萄糖组:39.50 vs对照组:43.14和33.28 vs36.23,(P<0.05);4.在15mM葡萄糖对2-cell晚期胚胎培养液中 H2O2含量的影响实验中,葡萄糖培养液中 H2O2的含量(7.55)显著(P<0.05)高于对照组(2.35)。 结论:1.在 mCZB培养液中,添加15 mM葡萄糖能够抑制小鼠1-细胞期胚胎体外发育,而低于15 mM的葡萄糖不产生抑制作用。2.高浓度的葡萄糖(15 mM)能够显著地增加小鼠2-细胞晚期胚胎培养液中ROS的含量。3.2-细胞晚期胚胎内部O2-.的增多也可能是葡萄糖对小鼠早期胚胎体外发育阻滞的部分原因。