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分子印迹技术是一种以分子识别理论为基础,能够制备出对模板分子具有特定选择性能的高分子聚合物的一种技术。以有机小分子为模板的分子印迹技术已经发展比较成熟,并且取得了一定的成果。但是,将分子印迹技术应用于如蛋白质等大分子印迹的研究中,仍然存在一定的困难。由于蛋白质的一些特殊性质(模板蛋白分子体积庞大,结构复杂、构象灵活性、水溶性)。导致蛋白质印迹技术进展相对缓慢,技术尚不成熟,仍需要改进常规的制备和分析方法来适应生物模板的物理性质。
本论文主要包括以下三部分内容:
一、综述了分子印迹技术的原理与蛋白质印迹技术的发展现状。
二、通过刻蚀表面印迹聚合物微球中心的硅而得到了一种具有中空结构的蛋白质印迹聚合物。首先将溶菌酶分子固定在硅球上进行表面印迹,在洗脱模板并刻蚀掉中心的硅球后得到中空的结构,在聚合物由洗脱模板而留下的孔道能够允许蛋白分子进入到中间的空间中,从而接触到印迹层内壁的印迹位点。吸附实验表明,这种中空的印迹聚合物具有很高的吸附容量和选择性,同时具有非常高的印迹因子。上述印迹聚合物还被成功的被应用于对蛋清溶液中的溶菌酶进行吸附,结果证明此类中空印迹聚合物能够用于从实际样中分离蛋白。
三、合成了一种通过羟丙基纤维素和聚丙烯酸支撑,具有中空结构的蛋白质印迹聚合物。首先让羟丙基纤维素和聚丙烯酸在硅球表面通过氢键进行自组装过程,然后通过非共价方法在羟丙基纤维素和聚丙烯酸包裹的硅球表面印迹蛋白质分子。在合成了表面印迹聚合物后,将中间的硅球刻蚀掉,得到中空的结构。吸附实验表明,这种中空的印迹聚合物具有很高的吸附容量和较好的选择性。上述印迹聚合物还被成功的应用于对蛋清溶液中的溶菌酶进行吸附,结果证明此类中空印迹聚合物能够用于从实际样中分离蛋白。