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【目的】骨髓干细胞移植已在临床广泛开展,并取得了令人鼓舞的效果,然而心脏干细胞移植中干细胞能否转化为心肌细胞仍存在许多争议。一些学者认为移植骨髓干细胞能够分泌促血管新生的活性因子,通过这些因子促进心肌血管新生,进而达到心功能改善的效果。骨髓液中是否含有较高浓度的促进血管新生的细胞因子目前尚无研究报道。 血管内膜损伤后,机体的应激反应使血清中多种细胞因子浓度明显增高,这些细胞因子对骨髓干细胞具有动员作用。这一作用是否改变骨髓液中促血管生长因子浓度,目前尚不清楚。 本实验的目的在于探明:1、正常骨髓液是否具有鸡胚绒毛尿囊膜(chick embryo chorioallantoic membrane,CAM)血管新生的作用;2、血管内膜损伤后的骨髓液比正常骨髓液是否具有更明显的促血管新生作用。 [方法] 1、血清及骨髓液的获取:4只新西兰大白兔经股动脉插入2.5F球囊导管至腹主动脉,球囊充气至2~4个大气压,来回拖拉球囊导管3次,建立血管内膜损伤模型。术前从耳缘静脉抽取静脉血3ml,从股骨抽取骨髓3ml,离心取血清及骨髓上清液。血管内膜损伤后第7天,同样方法从对侧耳缘和股骨抽取静脉血和骨髓并离心,取血清及骨髓液,为损伤后的血清及损伤后的骨髓液。 2、CAM模型和分组:种蛋在37.5±0.5℃、相对湿度60%条件下孵育。孵至第7天,在照蛋灯下画定1.0×1.0cm的开窗位置,75%酒精消毒种蛋大头端及开窗位置,在气室端钻一小孔并穿透气室壳膜,用锯条磨切蛋壳,掀开蛋壳,注射器针头刺破壳膜,滴加2滴生理盐水使CAM下陷,吸尔球从大头