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[目的]研究老鹳草素(geraniin)对骨质疏松骨折(osteoporotic fracture,OPF)家兔骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖及成骨分化的影响,探索老鹳草素对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用。[方法]1.复制家兔OPF模型:家兔双侧去卵巢后常规饲养3个月复制骨质疏松模型,测定骨密度(bone mineral density,BMD)和骨矿含量(bone mineral content,BMC),骨组织病理切片苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin,HE)确认骨质疏松模型复制成功后,骨锯线锯除挠骨中段约3 mm的骨质,复制OPF模型。2.BMSCs分离和鉴定:复制OPF模型后两周后采用梯度离心分离法分离BMSCs,贴壁培养到第三代,显微镜下观察细胞形态和流式细胞术鉴定细胞。3.老鹳草素对BMSCs增殖的影响:不同浓度(10-1～10-8 mol/L)的老鹳草素分别与BMSCs孵育,用CCK-8法检测细胞增殖变化。4.老鹳草素对BMSCs成骨分化的影响:不同浓度(10-11～10-8 mol/L)的老鹳草素与BMSCs孵育,采用钙钴法检测老鹳草素对BMSCs成骨分化的影响。5.老鹳草素对β-catenin、Lef-1、Wnt5a表达的影响:采用Q-PCR方法检测mRNA表达水平;采用Western blotting方法检测蛋白表达水平。[结果]1.OPF模型成功复制:去势家兔饲养3个月后,全身骨密度和骨矿含量均明显降低;HE染色显示骨小梁稀疏,软骨细胞层变薄,排列紊乱。骨折术后X光显示骨质咬除部位骨缺损明显。2.所分离细胞为BMSCs:培养的细胞有典型的BMSCs形态特征;流式细胞术鉴定表面抗原CD44、CD90呈高表达,CD34、CD45表达较低。3.CCK-8法检测结果显示,老鹳草素对骨质疏松性骨折家兔BMSCs的增殖没有明显促进作用。4.钙钴法细胞染色结果显示,老鹳草素能明显增加BMSCs中钙结节的数量和ALP活性。5.Q-PCR和Western blotting实验结果显示:老鹳草素能够明显上调BMSCsβ-catenin、Lef-1 mRNA和蛋白的表达,下调Wnt5amRNA和蛋白的表达。[结论]1.老鹳草素对骨质疏松性骨折家兔BMSCs增殖没有明显影响。2.老鹳草素明显上调Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin、Lef-1蛋白和mRNA的表达,下调Wnt5a蛋白和mRNA的表达,促进骨质疏松性骨折家兔BMSCs的成骨分化。