论文部分内容阅读
目的:探讨外源性IGF-1对全脑缺血大鼠空间学习记忆能力及对p-Akt、p-m TOR蛋白的影响,进而揭示IGF-1改善全脑缺血大鼠认知障碍的可能机制。方法:将成年雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组、假手术组、模型组、IGF-1组、IGF-1+PPP组。对各手术组大鼠行侧脑室置管术,术后第6天,采用改良Pulsinelli四血管阻断法(4-VO)复制全脑缺血模型,假手术组腹腔注射1ml DSMO(PPP溶媒),侧脑室注射NS10ul;模型组腹腔注射1ml DSMO,侧脑室注射NS10ul;IGF-1组腹腔注射1ml DSMO,侧脑室注射IGF-1 10ul(0.2ug/ul);IGF-1+PPP组腹腔注射1ml PPP(20mg/kg,溶于1ml DSMO),侧脑室注射IGF-1 10ul(0.2ug/ul),侧脑室注射晚于腹腔注射30分钟,连续注射7天。于分组前、药物处理7天后分别对各组大鼠行Morris水迷宫实验,水迷宫实验包括定位航行试验和空间探索实验;HE染色观察各组大鼠海马CA1区椎体细胞形态变化;免疫组化法检测各组大鼠海马CA1区p-Akt、p-m TOR蛋白的表达情况,采用Image Pro Plus 6.0软件处理免疫组化图片,统计IOD值,结果用SPSS17.0统计软件进行统计学处理。结果:1)Morris水迷宫实验结果:药物处理7天后,模型组大鼠全时程平均逃避潜伏期较正常组及假手术组延长(p<0.05),IGF-1组大鼠全时程平均逃避潜伏期较模型组缩短(p<0.05),IGF-1+PPP组大鼠全时程平均逃避潜伏期较IGF-1组延长(p<0.05);模型组大鼠跨越原平台次数较正常组及假手术组减少(p<0.05),IGF-1组大鼠跨越原平台次数较模型组增多(p<0.05),IGF-1+PPP组大鼠跨越原平台次数较IGF-1组减少(p<0.05);模型组大鼠在原平台象限游泳时间较正常组及假手术组减少(p<0.05),IGF-1组大鼠在原平台象限游泳时间较模型组增多(p<0.05),IGF-1+PPP组大鼠在原平台象限游泳时间较IGF-1组减少(p<0.05)。2)HE染色结果:模型组海马CA1区细胞较正常组及假手术组排列紊乱,细胞稀疏,细胞核不规则;IGF-1组海马CA1区细胞较模型组排列整齐,结构较清晰,不规则细胞减少。IGF-1+PPP组海马CA1区细胞较IGF-1组排列紊乱,细胞稀疏,细胞核不规则,可见核固缩。3)免疫组化结果:各组均可见p-Akt、p-m TOR阳性表达。模型组海马CA1区阳性表达较正常组及假手术组增多(p<0.05);IGF-1组海马CA1区阳性表达较模型组增多(p<0.05);IGF-1+PPP组海马CA1区阳性表达较IGF-1组减少(p<0.05);模型组及IGF-1+PPP组p-Akt、p-m TOR蛋白阳性表达差异没有统计学意义。结论:1)外源性IGF-1能够改善全脑缺血大鼠空间学习记忆能力。2)外源性IGF-1能够增加全脑缺血大鼠海马CA1区p-Akt、p-m TOR蛋白的表达水平;加用IGF-1受体阻断剂PPP后全脑缺血大鼠海马CA1区p-Akt、p-m TOR蛋白的表达水平较IGF-1组减少。提示IGF-1可能通过促进p-Akt及p-m TOR蛋白的表达,从而改善全脑缺血大鼠空间学习记忆能力。