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玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是镰刀菌产生的对人和动物具有毒害作用的类雌性真菌毒素,在自然界中广泛存在,通过污染谷类等作物进入到人和动物体内。ZEN的生物脱毒是目前的研究热点。本研究主要通过高通量微量筛选方法,利用菌株和毒素共培养,从617株芽孢杆菌中筛选出能够降解ZEN的菌株,对获得的菌株进行鉴定,探究其降解ZEN的特性,并构建了一株芽孢杆菌的Fosmid文库。研究结果如下:(1)通过高通量微量筛选方法,利用菌株和毒素共培养,从617株芽孢杆菌中筛选出12株芽孢杆菌能够将10.0μg/mL的ZEN完全清除;12株芽孢杆菌中有4株芽孢杆菌能够将15.0μg/m L的ZEN完全清除。(2)对4株芽孢杆菌的菌落形态观察和16S rDNA序列分析,确定菌株T-246为同温层芽孢杆菌(Bacillus stratosphericus),T-420为沙汾西芽孢杆菌(Bacillus safensis),373-2为一株新种芽孢杆菌,411-1为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。(3)菌株T-246、T-420、373-2和411-1分别能够在6 h、9 h、8 h和6 h内将15.0μg/mL的ZEN完全清除;且对ZEN同时具有降解和吸附作用;将4株芽孢杆菌的无细胞上清进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果表明:4株芽孢杆菌对ZEN的降解作用主要源自胞外酶。(4)探究了外界因素对菌株T-246降解ZEN效率的影响,结果表明:菌株T-246降解ZEN的最适p H为7.0-8.0;低浓度的EDTA可抑制菌株T-246对ZEN的降解;当金属离子的浓度在0.5-2.0 m M范围内时,Ni2+、Zn2+和Co2+能够抑制菌株T-246对ZEN的降解效率,抑制作用从强到弱依次为Zn2+>Co2+>Ni2+,Fe2+、Cu2+和Mn2+对T-246降解ZEN的效率没有抑制作用;且发现菌株T-246经ZEN诱导后,对ZEN的降解效率提高。(5)构建了菌株T-246的Fosmid文库,文库滴度为4.6×105 CFU/mL,重组质粒的外源片段的插入率为100%,插入片段大小平均为35 kb。文库以每孔约70-100个克隆的量制作10板96孔clone pool