海南蒲桃果实化学成分及降血糖活性研究

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海南蒲桃Syzygium cumini(L.)Skeels,又称乌墨、乌楣,为桃金娘科(Myrtaceae),蒲桃属(Syzygium)常绿乔木。海南蒲桃在世界范围内用于治疗糖尿病已有百年历史,但是研究者们对其降血糖活性的研究大多局限于植物不同部位的粗提物,其降糖活性物质及作用机制尚不明确。本论文以海南蒲桃可食用部位果实为研究对象,对其进行化学成分和降血糖活性研究,为其作为降糖功能食品的开发利用提供科学依据。本实验取350.0 g海南蒲桃干燥果实甲醇提取,提取液蒸干得甲醇提取物(130.0 g),用水混悬后依次采用乙酸乙酯和正丁醇溶剂进行液-液萃取,分别得不同萃取部位浸膏:乙酸乙酯提取物(14.5 g),正丁醇提取物(30.0 g)。本文对乙酸乙酯提取物进行分离纯化,通过正相硅胶柱色谱、开放ODS柱色谱、半制备HPLC、SephadexLH-20凝胶柱色谱等分离手段,共分离得到18个单体化合物。经IR、ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、2D-NMR数据分析及文献比对,确定这18个化合物分别为:2α-O-顺-对-香豆酰基马斯里酸(1),2α-O-反-对-香豆酰基马斯里酸(2),齐墩果酸(3),山楂酸(4),阿江榄仁酸(5),3β-O-反-对-香豆酰基马斯里酸(6),3β-O-顺-对-香豆酰基马斯里酸(7),熊果酸(8),科罗索酸(9),积雪草酸(10),Guavenoic acid(11),白桦脂酸(12),麦珠子酸(13),3β-O-反-对-香豆酰基麦珠子酸(14),clovane-2β,9α-diol(15),Hexadecanamide(16),胡萝卜苷(17)以及β-谷甾醇(18)。其中化合物1为新化合物,化合物1、2、15为首次从桃金娘科分离得到,化合物1、2、8、9、10、14、15为首次从该植物中分离得到。根据化学成分分离结果,采用碱提酸沉法提取海南蒲桃果实总三萜,并利用大孔树脂进一步纯化得果实总三萜富集物(TJFE),紫外分光光度法测得T]FE总三萜含量为48.4%,随后运用HPLC-UV法对其主成分进行分析,并评价其降糖活性。动物实验结果表明,TJFE(100mg/kg小鼠体重,灌胃给药)可降低C57BL/6小鼠餐后血糖,提高小鼠糖耐受能力,抑制糖异生。进一步的分子机制研究表明,TJFE可上调骨骼肌组织中Akt蛋白磷酸化水平和Glut4蛋白表达水平,提高小鼠胰岛素敏感性,增强小鼠糖摄取能力;并可抑制糖异生通路上三个关键基因Pgc1α,Pepck,G6Pase。本论文研究结果表明海南蒲桃果实中的三萜类化合物在海南蒲桃果实降糖活性中发挥着重要作用。
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