壳聚糖支架与滑膜间充质干细胞/软骨细胞同破损关节盘体内共培养的研究

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目的:滑膜间充质干细胞与其他组织来源的间充质干细胞相比成软骨细胞的能力更强。通过共培养,利用细胞间的相互作用促进干细胞的分化,结合复合支架材料提供三维空间更利于细胞的分化。本研究的目的是将滑膜间充质干细胞与软骨细胞混合培养于天然及人工支架材料上,观察三维环境下滑膜间充质干细胞与软骨细胞混合培养后的修复破损关节盘的能力。方法:取SD大鼠滑膜组织及软骨组织,酶消化法获得滑膜间充质干细胞及软骨细胞分别进行培养。取第3代滑膜间充质干细胞和第2代软骨细胞,二者以1∶2的比例混合培养负载于壳聚糖/I型胶原天然支架材料上,回植入裸鼠皮下培养4周、8周,进行免疫组织化学检测。结果:回植4周,8周后,支架材料保持圆盘状,破损关节盘同壳聚糖支架紧密粘连,表面附有一层筋膜,HE染色显示8周时细胞进入材料内部较4周时明显增多,破损关节盘与支架材料接触部位被细胞基质相连,经免疫组织化学检测,可见细胞及细胞基质II型胶原阳性表达,甲苯胺蓝染色,蛋白聚糖阳性表达。免疫组化及甲苯胺蓝染色结果呈阳性表达。结论:本实验表明含有共培养细胞的复合支架材料可以修复破损关节盘。
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