目的：观察清化湿热瘀毒方(简称“清化方”)含药血清对巨噬细胞条件培养液培养的大鼠肝星状细胞活化后的TLR4和TGF-β/Smad信号通路的调控机制,为周仲瑛教授倡导清化湿热瘀毒法治疗肝纤维化提供科学依据,从而为临床应用提供依据。方法：体外应用巨噬细胞条件培养液培养的大鼠肝星状细胞HSC-T6,以秋水仙碱含药血清为阳性对照、黄芪一贯煎含药血清为扶正法对照和清化方含药血清为实验组,清化方含药血清设0.55、1.1、2.2g·ml-1三个剂量组,采用MTT法检测清化方含药血清对HSC-T6细胞生长的影响,通过RT-PCR及Western Blot法检测清化方含药血清对活化后的大鼠肝星状细胞HSC-T6TLR4和TGF-β/Smad通路相关蛋白表达的影响。结果：(1)MTT结果显示：清化方含药血清以浓度和时间依赖的方式抑制活化后大鼠肝星状细胞HSC-T6的增殖,清化方含药血清在0.55、1.1、2.2g.ml-1浓度时作用24h、48h、72h后,其A值与空白对照组相比有显著差异；(2) RT-PCR法结果提示：清化方含药血清作用于活化后大鼠肝星状细胞HSC-T648h后,TGF-β1和TLR4水平显著降低,且呈浓度依赖性：(3) Western Blot法结果揭示：清化方含药血清对活化后大鼠肝星状细胞HSC-T6作用48h后,Smad3和Smad4蛋白表达水平降低,Smad7蛋白水平的表达增加,且呈浓度依赖性。结论：(1)清化方含药血清对大鼠肝星状细胞增殖具有显著抑制作用；(2)清化方含药血清可能通过抑制TGF-β1、Smad3、Smad4及TLR4的表达和促进Smad7蛋白的表达从而发挥抗肝纤维化的作用。