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围绕长蛸开展了五个方面的研究:实验研究了12种试剂对长蛸的麻醉作用;利用石蜡组织切片技术观察长蛸的中枢神经系统各神经叶的显微结构;利用石蜡组织切片和透射电镜技术对长蛸视叶区的内分泌器官视腺进行显微和超显微观察;利用RACE技术对长蛸生殖调控关键神经肽oct-GnRH基因克隆cDNA全长及分析;利用qRT-PCR技术检测oct-GnRH基因在长蛸的24个组织中的表达及分析。研究结果如下:1.在实验浓度下硫酸镁、丁香酚、MS-222、氯化锰、利多卡因、盐酸普鲁卡因、乙二醇苯醚、薄荷醇、苯佐卡因和三氯叔丁醇对长蛸无麻醉作用。将长蛸的麻醉程度分为5个时期,复苏过程分为4个时期。长蛸在15～35 g/L浓度氯化镁和10～40 m L/L浓度乙醇中能够达到第4期麻醉,此时期适于观察和操作。在一定浓度中,随着浓度的增加麻醉时间逐渐缩短,复苏时间逐渐增加。10 m L/L乙醇和20 g/L氯化镁对长蛸的麻醉和复苏总时间最短,分别为26 min和40 min。实验证明,乙醇和氯化镁均可作为长蛸的麻醉剂,在麻醉效率方面乙醇好于氯化镁。2.根据所处位置将脑分为三部分:食道上神经团、食道下神经团以及位于食道上下神经团两侧的视叶区。食道上神经团包含垂直叶、上额叶、下额叶、前基底叶和后基底叶,食道下神经团包含腕叶、足叶、巨细胞叶、色素细胞叶、内脏叶、外套内脏叶和血管舒缩叶,视叶区包含视神经、视叶、视腺、嗅叶、脑脚叶和视神经束。视腺位于视神经束区上,外有一层结缔组织包裹,与嗅叶和脑脚叶相邻;内部可观察到大量分泌细胞,细胞核较大,直径范围:4～8μm;分泌细胞含有丰富的粗面内质网、高尔基体及高尔基体分泌的分泌小泡与大泡。长蛸视腺结构特征与曼氏无针乌贼和真蛸的高度相似。3.oct-GnRH基因的cDNA全长为853bp,开放阅读框(ORF)长270bp(包含终止密码子),5?UTR为153bp,3?UTR为430 bp,编码的89个氨基酸具有BEN结构域和Pox-A3L结构域。分析了oct-GnRH基因的编码氨基酸序列与其他软体动物门的同源性,长蛸oct-GnRH与蛸属中真蛸的氨基酸同源性最高,其次为头足纲的曼氏无针乌贼和剑尖枪乌贼。系统进化树结果显示,oct-GnRH基因与蛸属中真蛸的亲缘关系最近,其次为头足纲的曼氏无针乌贼和剑尖枪乌贼,软体动物门中的腹足纲和瓣鳃纲物种亲缘关系较远。运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测oct-GnRH在成年长蛸24个组织的表达水平,结果表明oct-GnRH基因在18个组织中有表达,6个组织中无表达,oct-GnRH基因在食道上神经团和食道下神经团表达量较高,其中食道下神经团表达量最高,雌性个体表达量高于雄性个体。本研究首次在长蛸脑中克隆到oct-GnRH基因,其组织分布与表达水平表明oct-GnRH可能是长蛸生殖发育调控的关键神经肽,本研究结果可为长蛸生殖发育调控机制和实现工厂化养殖技术研究提供理论支持。