背景：非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)是全球发病率及病死率最高的恶性肿瘤之一。化疗是治疗NSCLC的主要方法之一，但癌细胞的多药耐药(multi-drug resistant，MDR)严重影响NSCLC的化疗效果。寻找NSCLCMDR相关因子，逆转NSCLC细胞的多药耐药对指导临床治疗具有重要意义。随机siRNA(small interfering RNA)文库是一种高通量逆向筛选策略，可以细胞表型为基础直接筛选出具有某种功能的靶分子。siRNA文库已用于肿瘤研究的多个领域，且近期有报道其在研究耐药基因方面的成功应用。　　目的：构建随机siRNA文库，以该文库为平台对非小细胞肺癌细胞进行筛选，获得MDR相关基因，从而为临床治疗做出指导。　　材料与方法：化学合成随机siRNA片段，将其连接至载体质粒构建随机文库。验证文库质量，以该文库转染人肺癌A549及A549/CDDP细胞株。用G418对转染后细胞进行加压筛选，挑出转入文库质粒的单克隆细胞。对单克隆细胞进行MTT实验，筛选出耐药性发生改变的细胞。通过PCR获得筛选后细胞的目的片段并测序验证。　　结果：成功构建了库容量为7×106的随机siRNA文库；以该文库成功转染了NSCLC细胞并挑出了耐药性发生改变的单克隆；通过PCR获得了目的siRNA片段。　　结论：新构建的随机siRNA文库有较大的信息容量：通过随机siRNA文库筛选NSCLC MDR相关基因的方法是有效的；随机siRNA文库为NSCLC MDR相关基因的研究提供了新的线索。