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H9N2亚型禽流感病毒自1966年在美国暴发以来,一直在全球多个国家流行,不仅给养禽业造成巨大的损失,并且还威胁到人类的健康。因此,对H9N2业型禽流感的遗传演化、抗原性以及致病性进行研究具有重要意义。
研究对1999年～2009年间所分离的68株H9N2亚型禽流感病毒的HA基因遗传演化,抗原决定簇氨摹酸序列以及不同毒株之间的交叉反应的研究结果:本研究中的所有毒株均属于欧亚群系的CK/BJ-like亚系,5个抗原决定簇的相关位点分析发现,主要的变异区域在C、D两个抗原决定簇,通过对不同毒株间交叉反应结果以及抗原变异系数R值的分析发现H9N2亚型禽流感毒株之间差异并不明显。分析HA的受体结合位点190位氨基酸突变频率高,多数病毒(45/68)HA基因的226位由Q突变为L。
对22株H9N2业型禽流感病毒全基因组测序以及遗传演化分析表明:病毒的8个基因片段全都属于欧亚群系,主要分布在CK/BJ-like、G1-like、G9-like、Y439-like、Y280-like、SH98-like等6个业群,本实验毒株并没有发生不同业型之间的重组。对各基因片段的核舒酸序列与氨基酸序列变异情况分析发现:①HA基因的裂解位点均为RSS(N)R,符合低致病性禽流感病毒的分子特征;部分毒株(5/22)的HA基因糖基化位点都有不同程度的丢失,也有部分毒株(12/22)获得了新的糖基化位点;②属于CK/BJ-like业系的9株病毒的NA基因均在62位～64位缺失了3个氨基酸,G9-like业系和Y439-like业系的毒株的NA基因没有发生任何位点的缺失;NA的受体结合位点和糖基化位点也都有不同程度的丢失和/或获得,部分唾液酸结合位点(HB)也发生了突变;③有两株病毒(2/22)的PB2的627位为K,其余病毒(20/22)在该位点为E;④有7株病毒的M2蛋白的31位氨基酸由S变为了N,这一突变符合流感病毒对金刚烷胺耐药的分子特征;⑤其他内部基因都未发现可以增强病毒毒力、复制力或者扩大宿主范围的分子特征。
对20株H9N2业型禽流感病毒对小鼠致病力的研究结果表明:多数病毒(19/20)都能够在BALB/c小鼠的肺内增殖,但增殖能力有差异。大部分的病毒(18/20)对小鼠均无致病力,感染病毒小鼠体重与对照组小鼠相比较也无明显差异。只有CK/YN/66/01,该毒株不但能使BALB/c小鼠体重减轻,还能在肺脏和脑内增殖。20株病毒中,有1株病毒未能在小鼠脑内和肺脏内检测到。