家蚕黄红茧系品种茧色形成相关色素物质的鉴定与转运研究

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国内研究机构目前保存的家蚕彩色茧主要有黄红茧系与绿茧系两大类。黄红茧系包括淡黄、金黄、肉色、红色、锈色等多种颜色。现已研究证明黄色茧茧色的形成机制是:类胡萝卜素结合蛋白(CBP)与脂类运载粒子在基因Y,I,C的调控下,将主要色素物质——类胡萝卜素从中肠运经血液,再进入家蚕丝腺。过去的研究主要是探讨黄茧中类胡萝卜素运载机制。但是,家蚕的黄红茧系包括许多彩色品种。究竟品种间为什么会产生这种色彩差异,类胡萝卜素的转运对这种色彩差异的产生到底有什么样的作用和影响,至今仍不清楚。要研究不同颜色黄红茧品种间色素调控机制的差异,首先需要弄清的是:不同茧色品种中色素的种类和含量如何,色素究竟是在进入家蚕哪一个组织时,在不同品种之间产生了种类和含量的差异,以及产生这种差异的原因。本论文针对这些问题进行了一些研究,主要结果如下:1.家蚕不同组织中类胡萝卜素的提取及鉴定使用萃取溶剂(正己烷:乙醇:丙酮=2:1:1,含0.01‰BHT)、超声破碎、冷冻离心、真空浓缩、皂化等方法,提取家蚕组织中的总类胡萝卜素,然后通过高效液相色谱仪(HPLC),采用梯度洗脱法将待测的总类胡萝卜素分离,最后再根据类胡萝卜素的标准样品的HPLC图谱和数据对分离物质进行定性和定量分析。这个方法是在总结前人方法的基础上,加以改进得出的。该方法可以用于家蚕组织、蚕茧中类胡萝卜素的提取。2.同一品种的不同组织中类胡萝卜素的差异分析通过数据统计分析,可知:锈色茧品种丝腺中β-类胡萝卜素含量最高,叶黄素和紫黄质几乎没有,而金黄色茧品种和红色茧品种则几种类胡萝卜素含量都较高,只是金黄色茧品种中叶黄素稍高,而红色茧品种中β-类胡萝卜素稍高。不同茧色的品种间差异较大,而相同茧色的不同品种之间也有细微的差异。3.同一组织、不同品种间类胡萝卜素的差异分析中肠、血液、丝腺组织和蚕粪、茧,基本上代表了类胡萝卜素在家蚕体内的转运流程。通过对同一组织、不同品种间类胡萝卜素含量的统计分析,得出结论:类胡萝卜素从血液进入丝腺的过程是颜色产生差异的关键过程。4.发育时间点对类胡萝卜素吸收转运的影响无论是哪一种类胡萝卜素,在哪一个品种的哪一个组织中,大致上都符合同一个规律:随着龄期的增长,类胡萝卜素的含量增多。这一规律同家蚕的进食规律相符合,即随着龄期的增长,家蚕的食桑量增加。同时,类胡萝卜素在家蚕组织中的转运效率也不断提高。5.金色茧品种中、后部丝腺的类胡萝卜素差异分析我们将家蚕黄茧品种Jinyi中部丝腺和后部丝腺中的色素物质分别进行检测,结果发现,类胡萝卜素主要集中在中部丝腺,而后部丝腺中几乎没有。这一结果同前人的研究一致。
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