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ZAC(zinc finger protein which regulates apoptosis and cell cycle arrest, ZAC)基因位于染色体6q24-25，此区域与多种实体肿瘤的发生有关，目前在大部分乳腺癌、卵巢癌、非功能性垂体腺瘤及头颈部鳞状细胞癌中均可检测到ZAC基因表达缺失或表达下调。ZAC基因编码诱导细胞调亡和调控细胞周期的锌指蛋白，具有肿瘤生长的作用，在乳腺癌和卵巢癌中经常表达沉默。
生长抑素(somatostatin. SST)是一种调节肽。在人体内生长抑素以28肽和14肽两种形式存在，分布较广泛，作用机制也较复杂。体外细胞研究和动物实验的研究证实，生长抑素不仅可以抑制内分泌细胞产生激素，而且对胃肠道肿瘤的生长有明显的抑制作用。
SST类似物奥曲肽(otreotide，OCT)可诱导垂体瘤细胞ZAC基因表达，抑制细胞生长。前期的研究表明，胃癌组织SST和ZAC基因的表达均明显降低，且两者的表达有正相关性，提示两者可能参与了胃癌的发生、发展。ZAC是否参与了SST抑制胃癌细胞增殖通路?
本研究分别克隆人白细胞、胃癌细胞BGC823和SGC7901的ZAC基因启动子，构建荧光素酶报告载体。转染胃癌细胞BGC823和SGC7901，经过G418筛选，OCT孵育后，应用Glomax荧光检测仪检测荧光素酶活性，分析OCT对胃癌细胞ZAC基因表达的效应，探讨ZAC在SST抑制胃癌细胞增殖通路的作用。
方法:
1．构建ZAC基因启动子荧光素酶报告载体应用PCR技术分别从人白细胞、胃癌细胞系BGC823和SGC7901克隆ZAC基因启动子并插入T载体，分别命名为pGEM-T-Human-P、pGEM-T-BGC823-P和pGEM-T-SGC7901-P。经NotI单酶切后，将启动子片段亚克隆至荧光素酶报告载体pGL4，构建ZAC基因启动子报告载体，分别命名为pGL4-Human-P、pGL4-BGC823-P和pGL4-SGC7901-P。重组质粒经XhoI/HindⅢ双酶切、PCR及测序鉴定。
2．转染及筛选SGC7901细胞实验对照组，转染pGL4；实验组，分别转染pGL4-Human-P质粒和pGL4-SGC7901-P；BGC823细胞：实验对照组，转染pGL4；实验组，分别转染pGL4-Human-P和pGL4-BGC823-P。应用脂质体LipofectamineTM 2000转染，G418筛选。
3．荧光素酶活性检测加入10nmol/L生长抑素孵育24h，提取细胞上清，Glomax荧光检测仪检测各组细胞生长抑素孵育前后荧光素酶活性。
4．统计学分析实验数据均采用SPSS18.0统计软件进行结果分析。所有数据以均数±标准差(x±s)表示，应用单因素方差分析进行组间数值差异比较，以P＜0.05为差异有显著性。
结果:
1．构建ZAC基因启动子荧光素酶报告载体pGL4-Human-P、pGL4-BGC823-P和pGL4-SGC7901-P，经XhoI/HindⅢ双酶切、PCR及测序鉴定，表明插入片段无误。pGL4-Human-P、pGL4-BGC823-P和pGL4-SGC7901-P3个报告载体构建成功。
2．荧光素酶活性检测SGC7901细胞：pGL4组、pGL4-Human-P组、pGL4-SGC7901-P组和荧光素酶活性分别为3635±51.3、32539±563.9和25134.5±37.3，实验组明显高于实验对照组(P＜0.05)；OCT孵育后，分别为4728.5±43.6、97128.4±827.7和70812.6±69.6，实验组明显增高(P＜0.05)。BGC823细胞：pGL4-Human-P组、pGL4-BGC823-P组和pGL4组荧光素酶活性分别为342.7±56.3、53998.6±753.9和5463.8±43.5，实验组明显高于实验对照组(P＜0.05)；OCT孵育后，分别为573±21.3、83206.5±289.6和9635±24.7，实验组明显增高(P＜0.05)。实验组SGC7901细胞荧光素酶活性明显高于BGC823细胞(P＜0.05)。
结论:
1．OCT可诱导胃癌细胞ZAC基因的表达。
2．ZAC基因的表达可能与胃癌细胞的分化程度有关。
3．ZAC可能参与了SST抑制胃癌细胞增殖通路。