【摘 要】
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根据狂犬病病毒SAD Bern株的全基因组序列(GenBank No.EF206720)与软件分析,将病毒基因组分为8个片段,构建到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,获得感染性克隆pcDNA-SAD.同时,基因合成时在G蛋白和L蛋白基因之间引入BsiW I和Nhe I酶切位点,以插入2个串联的狂犬病病毒G蛋白基因,获得携带3个G蛋白基因的重组质粒pcDNA-SAD-3G.利用脂质体转染法将纯化
【机 构】
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山东华宏生物工程有限公司,山东滨州,256600 中国兽医药品监察所,北京,100081
【出 处】
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2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微
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根据狂犬病病毒SAD Bern株的全基因组序列(GenBank No.EF206720)与软件分析,将病毒基因组分为8个片段,构建到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,获得感染性克隆pcDNA-SAD.同时,基因合成时在G蛋白和L蛋白基因之间引入BsiW I和Nhe I酶切位点,以插入2个串联的狂犬病病毒G蛋白基因,获得携带3个G蛋白基因的重组质粒pcDNA-SAD-3G.利用脂质体转染法将纯化的质粒pcDNA-SAD-3G及辅助质粒pcDNANP、pcDNA-P、pcDNA-L和pcDNA-G共转染BSR细胞、在BHK-21细胞上盲传,经RTPCR、IFA鉴定重组病毒.结果表明,本研究成功获得表达3个狂犬病病毒G蛋白的重组病毒RV-r3G,重组病毒RV-r3G的生长特性与亲本rSAD相比无明显差异,并且额外增加2个G基因同样不影响重组病毒的生长性能,重组病毒RV-r3G在感染细胞中表达G蛋白的总量显著高于亲本株rSAD,RV-r3G体外嗜神经性比野生型高,本研究为进一步研发安全、有效的狂犬病毒疫苗候选毒株奠定基础.
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为雷州黑鸭选育提供基础数据,取21周龄雷州黑鸭所产的青壳和白壳商品蛋各30枚,测定蛋形指数、蛋壳颜色、蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋重、蛋黄重、蛋黄颜色、哈氏单位,并对结果进行分析.结果表明青壳蛋蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋重、蛋黄重、蛋白高度、哈氏单位的均值均高于白壳蛋,而蛋黄比色和蛋黄相对重的均值低于白壳,但差异均不显著(p﹥0.05);青壳和白壳蛋的蛋壳厚度和蛋壳强度、蛋黄重和蛋重、蛋黄相对重和蛋黄重、哈
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猪δ冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus,PDCoV)是一种可引起仔猪腹泻的新发猪肠道冠状病毒.自2014年PDCoV在美国首次爆发以来,韩国、加拿大、墨西哥、泰国以及我国大陆地区先后报道了该病毒的存在.本研究从河南省某爆发腹泻的仔猪肠道中分离到一株PDCoV,命名为PDCoV CHN-HN-2014,并通过间接免疫荧光试验和电镜观察对其进行了鉴定.全基因组序列分析表明PDC
研究猪瘟病毒RNA在体外感染细胞中的分布及定位，本研究建立了一种准确、敏感的RNA可视化原位杂交技术.并对其强致病力毒株在细胞中的RNA定位分布进行了研究，发现病毒RNA吸附和进入靶细胞的时间早于0.5hpi.
猪瘟又称经典猪瘟(Classical Swine Fever,CSF),是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起猪的高度致死性、接触性传染病.CSFV是单股正链RNA病毒.RNA原位杂交基本原理是在细胞或组织结构保持不变的条件下,用标记的己知的RNA核苷酸片段,按核酸杂交中碱基互补配对原则,与待测细胞或组织中相应的基因片段杂交,所形成的杂交体经显色反应后
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