PI3K抑制剂对IL-25诱导的过敏原非依赖性哮喘气道重塑的抑制作用

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研究目的 :本课题组通过前期体外研究已发现IL-25可通过PI3K途径促进人脐静脉内皮细胞(HUVEC)产生碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和血管内皮生长因子(VEGF),从而促进新生血管形成。此外,体外研究亦发现PI3K泛特异性抑制剂LY294002可有效抑制IL-25诱导的新生血管形成。体内实验表明IL-25可引起小鼠嗜酸性粒细胞聚集、胶原纤维沉积、粘液分泌增加和新生血管形成等哮喘样炎症反应和气道重塑。同时体内实验发现LY294002可部分抑制IL-25诱导的过敏原非依赖性哮喘的气道高反应性及气道周围炎症细胞浸润。本研究旨在进一步探讨LY294002对气道重塑的作用,并进一步研究哮喘的发病机制,为PI3K抑制剂在哮喘干预治疗中的潜在应用奠定理论基础。方法 :使用8-10周龄雌性BALB/c小鼠、通过滴鼻法建立IL-25诱导过敏原非依赖性哮喘模型,以IL-25作为阳性对照组,实验组在使用IL-25之前滴鼻给予LY294002,以含溶剂(DMSO)的生理盐水作为阴性对照组。取实验的急性期、亚急性期、慢性期和恢复期小鼠肺组织常规石蜡包埋切片,用马松染色和过碘酸雪夫氏(PAS)染色观察胶原纤维沉积、黏液分泌等指标的变化,以α-SMA和CD31免疫组化染色观察平滑肌增生和新生血管形成的变化。结果 :与对照组相比,LY294002可明显降低IL-25诱导的小鼠肺组织总胶原含量、支气管管壁及其伴行动脉周围胶原纤维沉积,同时显著降低IL-25诱导的气道粘液分泌和杯状细胞增生。免疫组化染色显示LY294002能明显减少IL-25诱导的气道平滑肌增生及新生血管生成。结论 :本研究结果表明,PI3K泛特异性抑制剂LY294002可抑制IL-25诱导的过敏原非依赖性哮喘的气道重塑,为哮喘的发病机制研究及PI3K泛特异性抑制剂在慢性哮喘中的可能性应用提供了实验依据。
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