【摘 要】
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本研究利用RT-PCR方法测定了Asia1型口蹄疫病毒YNBS/58株的基因组序列,全长为8164nt,编码区长6990nt,编码2329个氨基酸;P1基因由2199nt组成,其中VP4、VP2、VP3、VP1基因依次包括255nt、657nt、654nt和633nt,5非编码区长1061nt,其中S片段长371nt,核糖体进入位点(IRES)片段435nt,功能未知区255nt;3非编码区长11
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃兰州,730046
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本研究利用RT-PCR方法测定了Asia1型口蹄疫病毒YNBS/58株的基因组序列,全长为8164nt,编码区长6990nt,编码2329个氨基酸;P1基因由2199nt组成,其中VP4、VP2、VP3、VP1基因依次包括255nt、657nt、654nt和633nt,5非编码区长1061nt,其中S片段长371nt,核糖体进入位点(IRES)片段435nt,功能未知区255nt;3非编码区长113nt.在完成了基因组测序的基础上,将结构蛋白基因P1、VP1、VP1C末端(cVP1)及VP1-牛干扰素a(boIFNa)融合基因分别克隆到原核表达载体中诱导表达.表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析表明,实现了重组P1、VP1、cVP1和VP1-boIFNa蛋白在大肠杆菌中的高效表达.重组蛋白均以不溶性的包涵体形式存在于菌体中.利用蛋白纯化试剂盒对重组蛋白进行了有效纯化.
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