【摘 要】
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建立双重RT-PCR方法同时快速检测基因A型和C型鸭甲肝病毒(DHAV-A，DHAV-C)。根据GenBank中公布的DHAV-A和DHAV-C全基因组序列，应用PrimerPremier 5.0 软件，针对DHAV-A的3C、3D和D
【机 构】
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西南民族人学生命科学与技术学院，四川成都 610041
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第一次全国鸭病防控高级研讨会
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建立双重RT-PCR方法同时快速检测基因A型和C型鸭甲肝病毒(DHAV-A，DHAV-C)。根据GenBank中公布的DHAV-A和DHAV-C全基因组序列，应用PrimerPremier 5.0 软件，针对DHAV-A的3C、3D和DHAV-C的2C区域分别设计了2对引物，通过对反应体系和反应条件的优化及特异性、灵敏度的分析，建立检测DHAV-A和DHAV-C的双重RT-PCR方法。结果显示该方法分别能从DHAV-A、DHAV-C阳性样本中扩增出DHAV-A(259bp)和DHAV-C(194bp)的特异片段，而不与其他被检的无关病原发生非特异反应;对DHAV-A和DHAV-C的最低检出限分别为6．3、3．4fg;对2009年8月至2011年7月送检病料检出DHAV-A和DHAV-C的阳性率分别为20％(14／70)、70％(49／70);随机抽取PCR鉴定为DHAV-C阳性的16份肝脏样本经病毒分离的阳性率与双重RT-PCR检测的阳性率均为100％(16／16)。建立的双重RT-PCR方泫具有良好的特异性和敏感性，可用于临床DHAV的快速诊断。
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