黄连素对大肠杆菌的体外药敏实验研究

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目的:测定黄连素对大肠埃希菌的MIC值。随着广谱抗菌药物的广泛、大量使用,细菌对抗菌药物的耐药性不断增加,给临床抗感染治疗带来极大的困难。作为祖国的传统医学,中药药源广泛、价格低廉,具有广阔开发潜力。因此积极探讨中药的抑菌作用,为指导临床合理使用中药协同抗生素治疗细菌感染提供依据,对减少细菌耐药性的产生有着积极的意义。方法:1.药液的配制:称取黄连素粉末100g,加入去离子水400ml,配制成浓度为250mg/ml药液,溶解后提取上清液,高压灭菌,待冷却后4℃冰箱保存备用。2.菌液的制备:配制0.5麦氏浓度菌液,用肉汤稀释菌液,使最终菌液浓度为5×10~5CFU/ml。3.两倍稀释法测定单药最小抑菌浓度:按CLSI推荐的琼脂稀释法测定实验菌株的MIC值,用大肠埃希菌ATCC25922作参考质控菌株。取12支灭菌试管并编号,第1~12管中各加入无菌MH肉汤培养基各1ml,于第一管中加入配制好的中药药液1ml,,混合后取出1ml加入第2管中,以此类推,直到第10管,取出1ml弃去,第11管不加药液作为对照;第12管加入受试药液1ml,不加菌液做为对照。然后其余每管加入供试菌液0.1ml,摇匀,置35℃培养箱内培养24h,后观察结果,以不发生浑浊变化的最高药物稀释倍数为该药物的最低抑菌浓度(MIC)。结果:最小抑菌浓度:测量20株大肠埃希菌,5株没有抑菌效果,15株MIC范围在31.6~125mg/ml之间。结论:中药对细菌的抑菌效果与抗生素一样,也存在敏感与耐药现象;且对于敏感菌株,其MIC值也不同。黄连素又名小蘖碱,中医认为,黄连性寒、味苦,具有清热解毒之功效。现代医学研究证明,黄连素是一种广谱抗菌药,对多种革兰阳性及阴性细菌都有作用。目前临床医生常根据经验用药给予黄连素治疗感染性腹泻,但缺乏针对具体病人个体化体外抑菌作用的实验室依据。本试验初步确立了本实验室黄连素药敏的实验方法,为进一步研究其他中草药的抑菌效果及建立中药药敏的其他方法打下基础。
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