【摘 要】
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乳糖酸(Lactobionic acid,LBA)是一种对细菌具有广谱抗菌性的高附加值有机酸,尤其是对重要的食源腐败细菌荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens,P.fluorescens)具有较好的抑菌活性.然而,在蛋白质水平上,LBA 对荧光假单胞菌的潜在抗菌机制及荧光假单胞菌对LBA 的响应机制尚不清楚.本研究通过顺序窗口采集所有理论质谱(Sequential windo
【机 构】
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沈阳农业大学食品学院沈阳 110866;上海交通大学农业与生物学院上海 200240 上海交通大学
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乳糖酸(Lactobionic acid,LBA)是一种对细菌具有广谱抗菌性的高附加值有机酸,尤其是对重要的食源腐败细菌荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens,P.fluorescens)具有较好的抑菌活性.然而,在蛋白质水平上,LBA 对荧光假单胞菌的潜在抗菌机制及荧光假单胞菌对LBA 的响应机制尚不清楚.本研究通过顺序窗口采集所有理论质谱(Sequential window acquisition of all theoretical mass spectra,SWATH-MS)进行定量蛋白质组学,以分析在LBA 胁迫下127 种显著差异表达的荧光假单胞菌蛋白质.结合超微结构观察和对活性氧、细胞外膜通透性及DNA 修复和核糖体自组装相关基因表达进行测定以验证蛋白质组学得到的结果.此外,利用平行反应监测(Parallel reaction monitoring,PRM)和实时荧光定量PCR 对目标蛋白和基因进行相对定量.综合分析结果表明,LBA 引起荧光假单胞菌胞内氧化应激和DNA 损伤,作为细胞壁应激信号并加速细胞分裂,引起低渗性休克并增加细胞外膜通透性,阻止鞭毛组装和生物膜产生,增加能量代谢,抑制核苷酸代谢及DNA 和蛋白质的合成.因此,本研究结果为乳糖酸在食品和制药行业中作为新型抗菌剂提供理论基础.
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