【摘 要】
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本文将人工合成的寡核苷酸片段进行体外“片段拼接”，克隆得到编码辣椒防卫素(CADEF1)的cDNA。把此cDNA编码成熟肽的序列克隆到表达载体pET28a(+)中,并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。表达的防卫素以包涵体的形式存在，融合蛋白最约占菌体总蛋白的8％。经过包涵体溶解和蛋白质复性后，利用融合蛋白上带有一段的组氨酸序列，以组氨酸亲合层析柱进行分离纯化融合蛋白。纯化的CADEF1显
【机 构】
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北京大学药学院,北京 100083 中国
【出 处】
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第六届全国药用植物和植物药学术研讨会
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本文将人工合成的寡核苷酸片段进行体外“片段拼接”，克隆得到编码辣椒防卫素(CADEF1)的cDNA。把此cDNA编码成熟肽的序列克隆到表达载体pET28a(+)中,并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。表达的防卫素以包涵体的形式存在，融合蛋白最约占菌体总蛋白的8％。经过包涵体溶解和蛋白质复性后，利用融合蛋白上带有一段的组氨酸序列，以组氨酸亲合层析柱进行分离纯化融合蛋白。纯化的CADEF1显示对病原真菌大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)的生长具有抑制作用。
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