【摘 要】
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目的 本研究旨在观察自噬在严重烧伤后心肌损害中的作用，并探讨在缺氧和/或AngⅡ刺激条件下自噬发生的调控机制。材料和方法 原代培养S-D大鼠乳鼠心肌细胞，以缺氧和/或Ang Ⅱ刺激来模拟烧伤后心肌细胞的应激条件，首先以透射电镜确认此条件下心肌细胞自噬活性的变化。再以DHE活细胞荧光染色来半定量缺氧和/或Ang Ⅱ刺激条件下心肌细胞ROS含量；以MDC活细胞荧光染色以及Western Blottin
【机 构】
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解放军第159中心医院全军烧伤中心,河南驻马店463008 第三军医大学第一附属医院全军烧伤研究所
【出 处】
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全国第二十三届烧伤专业委员会学术会议
论文部分内容阅读
目的 本研究旨在观察自噬在严重烧伤后心肌损害中的作用，并探讨在缺氧和/或AngⅡ刺激条件下自噬发生的调控机制。材料和方法 原代培养S-D大鼠乳鼠心肌细胞，以缺氧和/或Ang Ⅱ刺激来模拟烧伤后心肌细胞的应激条件，首先以透射电镜确认此条件下心肌细胞自噬活性的变化。再以DHE活细胞荧光染色来半定量缺氧和/或Ang Ⅱ刺激条件下心肌细胞ROS含量；以MDC活细胞荧光染色以及Western Blotting方法来确定心肌细胞自噬活性的改变。抑制ROS后观察以上指标变化，明确ROS与自噬间的关系。以ELISA的方法来定量缺氧和/或Ang Ⅱ刺激条件下心肌细胞内PKCδ和PKCε表达量的变化，同时确认重组慢病毒siRNA调低PKC e表达的效果。通过PKCδ特异性的抑制剂及PKCε慢病毒siRNA干扰，观察病缺氧和/或Ang Ⅱ刺激条件下心肌细胞ROS含量和自噬活性的变化，明确PKC δ和PKCε在这些应激条件下的作用。
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