背景自身免疫性肝炎（AIH）是与自身免疫有关的,以高丙种球蛋白血症、多种自身抗体有关的肝脏慢性炎症性疾病。抗核抗体（ANA）和抗平滑肌抗体（SMA）是AIH主要的血清学指标。抗ASGPR抗体和抗-可溶性肝抗原（SLA）抗体为公认的AIH活动度相关的抗体,抗体阳性率分别达到50～88%和10～30%。ASGPR是一种异源低聚物的内吞受体,定位于肝脏实质细胞膜表面。ASGPR识别并结合乳糖残基或乙酰乳糖残基的功能区称为糖类识别区（carbohydrat recognition domain CRD）,含有H1和H2 2种亚基,其中H1亚基在ASGPR识别配体和介导内吞中发挥作用。目的克隆去唾液酸糖蛋白受体（asialoglycoproteinreceptor,ASGPR）H1亚单位显性表位435bp基因片段,构建表达重组质粒,进行表达、纯化,以获得具有免疫活性的ASGPR蛋白,建立间接ELISA法,并探讨其在检测自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis,AIH）中抗ASGPR抗体的价值。方法将ASGPR H1亚单位糖类识别区（CRDH1）435bp的基因片段定向克隆至真核表达载体PEGH,经D-半乳糖诱导表达,表达产物用谷胱甘肽凝胶珠（Glutathione Sepharose 4B）亲和纯化,并通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和免疫印迹法（WB）及蛋白质质谱学（MALDI-TOF）进行免疫活性的鉴定,应用表达蛋白建立ELISA法。同时用该方法检测30例正常献血者,30例系统性红斑狼疮（SLE）,30例类风湿关节炎（RA）,10例原发性干燥综合征（SS）,45例AIH患者。结果经重组质粒测序结果证实,CRDH1/PEGH目的基因已正确插入真核表达载体中,基因序列正确,符合表达框架;SDS-PAGE检测表达产物在42500处有一明显的蛋白表达条带,质谱蛋白肽指纹数据通过Mascot在人类蛋白质数据库中分析比对,与ASGPR H1亚单位蛋白同源性为98.34%,WB分析表明,重组蛋白具有人ASGPR抗原反应性;间接ELISA法检测血清结果显示,AIH组中抗ASGPR抗体的阳性率为35.6%,非AIH组均为阴性,其差异有统计学意义（X~2=31.85,均P<0.01）。结论本研究成功克隆人核包膜蛋白自身抗原ASGPR H1基因,并将其在啤酒酵母菌中成功表达,且重组的自身抗原具有较好的抗原性和特异性。应用纯化蛋白建立的间接ELISA法检测AIH抗ASGPR抗体具有较好的特异性。