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目的：本实验进行了mTOR阻滞剂RAD001与多西紫杉醇联合作用于乳腺癌干细胞的体内、体外作用研究。方法：在体外实验，我们以原代乳腺癌细胞、MCF-7及MDA-MB-231乳腺癌细胞系为研究对象，利用流式细胞仪进行分选ESA+CD44+CD24-/low表达的乳腺癌细胞为乳腺癌干细胞，利用MTT方法研究RAD001单一用药与RAD001联合多西紫杉醇对不同乳腺癌于细胞的生长抑制作用。利用流式细胞仪，分析单一用药及联合用药对乳腺癌干细胞细胞周期及凋亡的影响，采用软克隆琼脂实验了解药物对乳腺癌干细胞成瘤性的影响。在体外实验中，本研究将从MDA—MB 231细胞系中分选出的乳腺癌干细胞植入BALB/c裸鼠体内，并给予RAD001及RAD001联合多西紫杉醇治疗，对肿物大小及动物体重进行检测，并KI-67，CD31，AKT1及pAKT(Thr308)指标进行免疫组化检测。结果：在体外试验中，RAD001对乳腺癌干细胞的生长抑制作用呈浓度梯度依赖性，；且相较于未进行分选的细胞，三种乳腺癌干细胞均对RAD001存在一定的耐药性，其中MCF-7乳腺癌干细胞对RAD001最为敏感。在药物联合作用研究中，相较于单一用药组，RAD001联合多西紫杉醇对细胞生长抑制作用有显著增加(P<0.001)。相对于单一用药组，联合用药可诱导G2-M期阻滞增加且更加诱导早期凋亡(P<0.01)。在体内研究中，RAD001联合多西紫杉醇治疗可显著缩小肿瘤范围(P<0.05)，且K167、cD34、pAKT及AKT1蛋白表达均有所下调。结论：本实验中的体内、体外研究表明，多西紫杉醇与RAD001联合用药可一定程度上增强各自对乳腺癌干细胞的抑制作用，为乳腺癌患者提供新的治疗选择，其联合作用效果仍需要大规模的临床试验进一步验证。