马铃薯卷叶病毒衣壳蛋白原核表达及多克隆抗体的制备

来源 :2020中国马铃薯大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yongheng0106
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中国是世界第一大马铃薯生产国,种植面积占全球25%,总产量约占全球的20%,随着2015年中国提出马铃薯主粮化战略,马铃薯已成为第四大主粮作物.在马铃薯的生产过程中,病毒病是最严重的病害之一,其可以通过种薯传播,所以脱毒种薯的质量检测在生产繁育中尤为重要.马铃薯卷叶病毒(Potato leafroll virus,PLRV)是马铃薯主要病害之一,当病毒侵染植株后,会造成叶片卷曲,降低光合效率,严重影响了马铃薯的产量和质量.研究成功克隆PLRV CP基因,改造其密码子,使其偏好原核表达,构建pCznl-PLRV CP重组表达载体,通过大肠杆菌表达纯化,经Western Blot方法鉴定为PLRV CP蛋白,纯化后的蛋白免疫日本大耳兔,成功制备PLRV CP蛋白多克隆抗体,识别重组蛋白效价为128000倍,识别天然病毒的效价为32000倍,经Western Blot方法分析,其特异性良好。研究制备的多克隆抗体,对马铃薯脱毒种薯的检测提供必需的生物材料,为PLRV的检测方法奠定了基础。
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