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目的 本研究拟选取组织因子(TF)作为监测动脉粥样易损斑块演变的靶点,以凝血因子FVII上EGF1作为导向功能基,选择新型磁共振材料超顺磁氧化铁(SPIO)作为成像材料,拟构建EGF1多肽偶联的超顺磁性氧化铁纳米粒探针(EGF1-SPIONs),进一步探讨其在磁共振成像评价动脉粥样易损斑块形成及演变中的作用.方法 选用PEG化磁性氧化铁(羧基末端)(Fe3O4@PEG) 5mg分散于pH=6的MES缓冲液中,加入EDC (0.5mL,10mg/mL),和sulfo-NHS(1mL,10mg/mL)4℃摇床反应30min;超滤离心,除去多余的EDC和NHS;加入事先合成好的EGF1多肽(2.5mg)继续反应过夜;超滤,滤去没有偶联上的多肽;所得产物用粒度分析仪检测颗粒的水动力尺寸和zeta电位;对滤出液进行BCA试剂盒检测,测得滤出液中所含多肽的量;对所得的产物用透射电子显微镜、紫外分光光度计等检测其性质表征;进一步研究在不同时间、不同浓度、不同温度等条件下高表达TF细胞对SPIO与EGF1-SPIO摄取的差异,并用电子显微镜观察了纳米粒被细胞摄取后的位置.结果 通过电镜及粒径检测发现Fe3O4@PEG纳米颗粒具有明显核壳结构,内部为Fe3O4核,平均尺寸为9.90纳米,外部为PEG壳层;根据偶联前后颗粒水动力尺寸对比,探针水化层较厚,表面修饰效果较好,颗粒稳定性较好.EGF1多肽偶联后,颗粒水动力尺寸一定程度增大,多肽包被成功;BCA试剂盒检测出成功偶联在Fe3O4@PEG的多肽的量为2.07mg,偶联效率82.8%;紫外检测,偶联前后无明显差异,280nm处未发现明显波峰.PEG@Fe3O4-EGF1探针与PEG@Fe3O4对比,水动力尺寸、Zeta电位均发生变化,EGE1多肽成功偶联至SPIONs上;体外细胞实验显示高表达TF细胞对EGF1-SPIO的摄取大于对照组,初步表明EGF1-SPIO可定位于细胞膜表面TF.结论 EGF1-SPIONs作为组织因子靶向性纳米探针具有良好理化性质和生物学活性,可为易损斑块动态监测评估提供新手段.