【摘 要】
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为了研究有效的疫苗免疫增强佐剂以预防和治疗鸡免疫失败病，设计引物扩增、克隆鸡白细胞介素-6(ChIL-6)成熟肽基因并进行原核表达，对表达的融合重组蛋白(rChIL-6)通过尿素变性、复性液复性、PBS溶液透析等步骤进行纯化，通过测定rChIL-6的促小鼠脾脏淋巴母细胞增殖活性来评估蛋白的生物学活性;将120只SPF鸡平均分成12组，分别接种NDV活疫苗、AIV H5N1灭活疫苗以及NDV、AIV
【机 构】
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河南省动物疫病预防控制中心,河南 郑州 450008 河南省动物疫病预防控制中心,河南 郑州 45
【出 处】
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河南省畜牧兽医学会第七届暨2008年学术研讨会理事会第二次会议
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为了研究有效的疫苗免疫增强佐剂以预防和治疗鸡免疫失败病，设计引物扩增、克隆鸡白细胞介素-6(ChIL-6)成熟肽基因并进行原核表达，对表达的融合重组蛋白(rChIL-6)通过尿素变性、复性液复性、PBS溶液透析等步骤进行纯化，通过测定rChIL-6的促小鼠脾脏淋巴母细胞增殖活性来评估蛋白的生物学活性;将120只SPF鸡平均分成12组，分别接种NDV活疫苗、AIV H5N1灭活疫苗以及NDV、AIV疫苗分别加4个不同浓度的rChIL-6蛋白佐剂同时注射来评价不同浓度rChIL-6蛋白的免疫增强作用。结果成功克隆、表达了ChIL-6基因和蛋白，融合蛋白大小25kD左右，与预期大小相一致，经纯化后的蛋白纯度在95％以上;100 pg/mL rChIL-6具有较高的促小鼠脾淋巴细胞增殖活性;0，Oμg/mL浓度的rChIL-6蛋白对NDv和AIV H5N1疫苗具有最好的免疫增强作用，但与其他实验组鸡相比，对免疫抗体产生时间及抗体滴度峰值出现和维持时间均没有明显的影响;过高或过低浓度的rChlL-6蛋白对疫苗免疫增强作用不明显。研究结果表明合适浓度的rChIL-6蛋白对鸡疫苗免疫后具有明显的免疫增强作用。
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