【摘 要】
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用鸡致病性大肠杆菌分离株O1、O2和O78的基因组DNA做为模板,PCR分别扩增出了0.55Kb的P型菌毛结构基因(papA).将扩增得到的3个papA基因片段,分别克隆进pGEM-TR载体中,转化至受体菌JM109中,用Amp/IPTG/X-gal琼脂平板蓝白菌落筛选法,得到含阳性重组子的菌株,提取质粒后用BamH I和Sal I双酶切进行鉴定.所得阳性重组子进行DNA序列测定,测序结果经DNA
【出 处】
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中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会
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用鸡致病性大肠杆菌分离株O1、O2和O78的基因组DNA做为模板,PCR分别扩增出了0.55Kb的P型菌毛结构基因(papA).将扩增得到的3个papA基因片段,分别克隆进pGEM-TR载体中,转化至受体菌JM109中,用Amp/IPTG/X-gal琼脂平板蓝白菌落筛选法,得到含阳性重组子的菌株,提取质粒后用BamH I和Sal I双酶切进行鉴定.所得阳性重组子进行DNA序列测定,测序结果经DNAStar核酸分析软件包进行分析比较,结果表明,所构建的克隆质粒中均含有相应完整papA基因,其开放式阅读框架大小为549bp,编码182个氨基酸.此三菌株的P型菌毛结构基因的同源性为98.9~100﹪,其中O1株和O78株的P型菌毛基因的ORF序列100﹪相同,O2株的也只是有2个碱基与前二者不同.
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