【摘 要】
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正常生命过程中产生的超氧阴离子自由基是维持生命所必需的,当其浓度过高时,对机体会造成损害.因此超氧化物歧化酶作为其特异清除剂,在生物体的生命活动中具有重要意义.近年
【机 构】
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华东理工大学生物反应器国家重点实验室,上海,200237
【出 处】
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第八届全国工业生化与分子生物学学术大会
论文部分内容阅读
正常生命过程中产生的超氧阴离子自由基是维持生命所必需的,当其浓度过高时,对机体会造成损害.因此超氧化物歧化酶作为其特异清除剂,在生物体的生命活动中具有重要意义.近年来专家注意到存在于线粒体中的Mn-SOD较Cu,Zn-SOD具有更为高效的清除氧自由基的功能,并对Mn-SOD在许多肿瘤形成过程中所扮演的角色发生了浓厚的兴趣.由于天然的Mn-SOD来源较困难,因此借助基因工程的方法获得大量的重组Mn-SOD不失为一种较好的选择,可以为Mn-SOD的应用研究提供材料.本实验在贺华君博士构建的rhMn-SOD质粒的基础上将其转入大肠杆菌中表达,研究了工程菌发酵和Mn-SOD目的蛋白纯化的优化策略.1.表达菌株的构建将rhMn-SOD质粒用CaCl2法转入大肠杆菌BL21(DE3)株,构建的工程菌经质粒DNA测序证实为Mn-SOD基因序列.2.工程菌生长曲线,质粒稳定性测定及种子瓶培养时间的确定3.二级摇瓶发酵诱导和发酵条件的优化4.纯化条件的优化
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