RNA病毒的反向遗传学及其在FMDV研究中的应用

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dianzishu1981
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文对RNA病毒的反向遗传学及其在FMDV研究中的应用进行了研究。文章围绕RNA病毒基因组感染性克隆技术的早期发展、RNA病毒全长cDNA克隆技术的策略、影响全长cDNA感染性克隆的因素、反向遗传学在口蹄疫病毒研究中的应用等进行了论述。
其他文献
本文对猪的牛病毒性腹泻病毒感染进行了研究。文章指出,猪感染牛病毒性腹泻病毒后可产生类似猪瘟的临床症状和病变,怀孕母猪感染牛病毒性腹泻病毒后,会发生流产或产出畸形胎儿。本文围绕病原、临床症状、病理变化、诊断和防治进行了论述。
将猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSVORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分别用6μg基因枪轰击和200μg、100μg+100μgpcDNA-IL-2、100μg、50μg肌肉注射的方法免疫BALB/c小鼠,于免疫后不同时间取免疫部位肌肉、肠、肝、脾、肾、心肌、肺脏和脑等组织器官,多聚甲醛固定,石蜡包埋.用原位PCR检测基因枪轰击和肌肉注射免疫后不同时间PRRSVORF5基因疫苗
将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分别以6μg基因枪轰击以及200μg、100μg+100μg猪白介素2真核表达质粒(pcDNA-IL-2)、100μg和50μg肌肉注射的方法免疫BALB/c小鼠,免疫后不同时间分别取各组BALB/c小鼠肠、肝、脾、肾、心、肺、免疫部位肌肉和脑等组织器官.多聚甲醛固定,石蜡包埋.以蔗糖密度梯度离心法提纯的
猪繁殖与呼综合征病毒ORF5基因疫苗(pcDNA-PRRSV-ORF5)以不同免疫途径(基因枪和肌肉注射)免疫BALB/c小鼠,以PBS和空载质粒pcDNA3.1(+)为对照,采用流式细胞仪(FACS)、淋巴细胞增殖试验(MTT法)及间接ELISA试验分别对小鼠外周血中CD4+、CD8+T淋巴细胞数、T淋巴细胞的转化功能及小鼠血清中特异性PRRSV血清抗体IgG动态变化进行了检测.结果表明,pcD
泛素-蛋白酶体途径是一种高效蛋白降解途径,主要负责真核细胞内蛋白选择性降解.GP5囊膜糖蛋白是PRRSV的主要结构蛋白,为了评价泛素基因对GP5基因免疫的影响,本研究将ORF5DNA片段克隆到载体pCMV-Ub,构建成重组质粒pCMV-GP5、pCMV-Ub-GP5.测序分析编码框正确后进行小鼠免疫试验,共免疫4次,每次间隔15天,以比较GP5基因和与泛素融合表达GP5基因的免疫特性.结果表明,两
本研究通过RT-PCR方法扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)S1株的M蛋白基因,将其克隆重组到人血清5型腺病毒载体中,转染293细胞,制备重组腺病毒rAd-M.RT-PCR和IFA方法鉴定,结果表明rAd-M可表达M基因的mRNA和M蛋白.纯化的rAd-M重组腺病毒经HEK-293A细胞连续传25代,滴度稳定为107.8TCID50/ml.动物免疫试验结果表明,该重组腺病毒rAd-M能够刺激
猪繁殖与呼综合征病毒(PRRSV)0RF5基因疫苗(pcDNA-PRRSV-ORF5)以50μg、100μg和200μg三种剂量肌注免疫BALB/c小鼠,以PBS和空载质粒pcDNA为对照,采用流式细胞仪(FACS)、淋巴细胞增殖试验(MTT法)分别对小鼠外周血中CD4+、CD8+T淋巴细胞数和淋巴细胞的转化功能进行检测.结果表明,三个剂量的pcDNA-PRRSV-ORF5基因疫苗接种小鼠后外周血
本文对CSFV E2与PRRSV GP5重组PRV载体的构建及其生物学特性进行了分析。文章通用转移载体进行了改造,构建了以lacZ为筛选标记并同时表达CSFV E2,PRRSV GP5基因的三基因转移载体,以脂肢体为介质包裹质粒载体DNA与PRV基因组共转染VERO细胞,进行数次蚀斑克隆传代筛选并纯化重组病毒,同时利用Western免疫印迹试验与间接免疫荧光试验检测了E2与GP5的表达情况,并对重
根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ATCCVR2332株的核衣壳蛋白基因的核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物.应用RT-PCR方法扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒GF1107株(GenBank登陆号:AY684124)的ORF7片段.将扩增片段克隆入pMD18-T载体中获得含有相应片段的重组质粒pMDHB-ORF7.对质粒中的插入片段进行序列测定测序.应用DNAstar序列分
本文对表位及多表位疫苗进行了研究。文章围绕免疫显性表位与表位疫苗、显性免疫机制、表位鉴定、表位模拟、表位递呈等进行了论述。