【摘 要】
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泛素-蛋白酶体途径是一种高效蛋白降解途径,主要负责真核细胞内蛋白选择性降解.GP5囊膜糖蛋白是PRRSV的主要结构蛋白,为了评价泛素基因对GP5基因免疫的影响,本研究将ORF5DNA片段克隆到载体pCMV-Ub,构建成重组质粒pCMV-GP5、pCMV-Ub-GP5.测序分析编码框正确后进行小鼠免疫试验,共免疫4次,每次间隔15天,以比较GP5基因和与泛素融合表达GP5基因的免疫特性.结果表明,两
【机 构】
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南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京,210095
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会
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泛素-蛋白酶体途径是一种高效蛋白降解途径,主要负责真核细胞内蛋白选择性降解.GP5囊膜糖蛋白是PRRSV的主要结构蛋白,为了评价泛素基因对GP5基因免疫的影响,本研究将ORF5DNA片段克隆到载体pCMV-Ub,构建成重组质粒pCMV-GP5、pCMV-Ub-GP5.测序分析编码框正确后进行小鼠免疫试验,共免疫4次,每次间隔15天,以比较GP5基因和与泛素融合表达GP5基因的免疫特性.结果表明,两个不同质粒免疫后44-59天均诱导产生了ELISA抗体和中和抗体,抗体产生时间和抗体滴度差异不显著.
其他文献
以蔗糖密度梯度离心法提纯的PRRSV-SC1株作为抗原,免疫家兔制备兔抗PRRSV的IgG,成功建立了检测猪繁殖与呼吸道综合症病毒抗原的间接免疫酶组织化学法.该方法只与PRRSV感染猪组织呈现阳性反应,与猪瘟病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒、猪乙脑病毒人工感染并致死仔猪的肝脏组织呈现阴性反应.用该方法检测PRRSVSC-1株人工感染28日龄仔猪,感染后3天即可在肺门淋巴结检测到PRRSV抗原;感染初
将猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSVORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分别用6μg基因枪轰击和200μg、100μg+100μgpcDNA-IL-2、100μg、50μg肌肉注射的方法免疫BALB/c小鼠,于免疫后不同时间取免疫部位肌肉、肠、肝、脾、肾、心肌、肺脏和脑等组织器官,多聚甲醛固定,石蜡包埋.用根据ORF5基因序列设计的特异性生物素标记的寡核苷酸探针进行原位杂交,检测
利用原位末端标记(TdT-mediateddUTPnickandlabeling,TUNEL)方法检测猪繁殖与呼吸综合征(Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS)病毒感染仔猪后所产生的凋亡,8h即可检测到细胞凋亡,30h即发生明显的细胞凋亡,且凋亡细胞数目在感染第七天达到高峰,第七天以后逐渐减少,至感染后42天时仍能检测到少量凋亡细胞.PRRS
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型标准株(ATCCVR-2332)的ORF6及ORF7部分保守序列,设计合成一对特异引物,通过优化RT-PCR反应条件,建立了从血清中检测猪PRRSVRT-PCR诊断方法.利用该方法检测PRRSV感染猪经高滴度特异性免疫血清治疗后血清中病毒RNA,6周内PRRSVRNA检测均为阴性,表明高滴度特异性中和抗体完全终止了PRRSV感染猪体内病毒复制.
本文对细胞因子的检测及其在鸡病毒性免疫抑制病中的应用进行了研究。文章围绕细胞因子检测的意义、细胞因子检测方法、细胞因子检测技术的应用等进行了论述。
将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分别以6μg基因枪轰击以及200μg、100μg+100μgpcDNA-IL-2、100μg和50μg肌肉注射的方法免疫BALB/c小鼠,免疫后不同时间分别取各组BALB/c小鼠胃、肠、肝、脾、肾、心、肺、免疫部位肌肉和脑等组织器官.通过PCR检测基因疫苗在BALB/c小鼠体内的分布规律,结果表明:于免疫
本文对猪的牛病毒性腹泻病毒感染进行了研究。文章指出，猪感染牛病毒性腹泻病毒后可产生类似猪瘟的临床症状和病变，怀孕母猪感染牛病毒性腹泻病毒后，会发生流产或产出畸形胎儿。本文围绕病原、临床症状、病理变化、诊断和防治进行了论述。
将猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSVORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分别用6μg基因枪轰击和200μg、100μg+100μgpcDNA-IL-2、100μg、50μg肌肉注射的方法免疫BALB/c小鼠,于免疫后不同时间取免疫部位肌肉、肠、肝、脾、肾、心肌、肺脏和脑等组织器官,多聚甲醛固定,石蜡包埋.用原位PCR检测基因枪轰击和肌肉注射免疫后不同时间PRRSVORF5基因疫苗
将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分别以6μg基因枪轰击以及200μg、100μg+100μg猪白介素2真核表达质粒(pcDNA-IL-2)、100μg和50μg肌肉注射的方法免疫BALB/c小鼠,免疫后不同时间分别取各组BALB/c小鼠肠、肝、脾、肾、心、肺、免疫部位肌肉和脑等组织器官.多聚甲醛固定,石蜡包埋.以蔗糖密度梯度离心法提纯的
猪繁殖与呼综合征病毒ORF5基因疫苗(pcDNA-PRRSV-ORF5)以不同免疫途径(基因枪和肌肉注射)免疫BALB/c小鼠,以PBS和空载质粒pcDNA3.1(+)为对照,采用流式细胞仪(FACS)、淋巴细胞增殖试验(MTT法)及间接ELISA试验分别对小鼠外周血中CD4+、CD8+T淋巴细胞数、T淋巴细胞的转化功能及小鼠血清中特异性PRRSV血清抗体IgG动态变化进行了检测.结果表明,pcD