【摘 要】
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本研究通过RT-PCR方法扩增获得了美洲型PRRSV N基因,分别构建了克隆载体pMD19-T-N和毕赤酵母表达载体pPIC9K-N,并进行了PCR和双酶切鉴定.PCR和双酶切鉴定结果均得到预期大小的片段,结果表明成功建立相应载体.将pPIC9K-N经Sac Ⅰ线性化后电转化毕赤酵母宿主菌GS115获得阳性重组菌,重组子经G-418筛选后表型鉴定为Mut+,且PCR鉴定为阳性.阳性重组子经甲醇诱导
【机 构】
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四川农业大学动物医学院 动物传染病与基因芯片实验室 四川省动物疫病与人类健康重点实验室 四川 雅安 625014
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会
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本研究通过RT-PCR方法扩增获得了美洲型PRRSV N基因,分别构建了克隆载体pMD19-T-N和毕赤酵母表达载体pPIC9K-N,并进行了PCR和双酶切鉴定.PCR和双酶切鉴定结果均得到预期大小的片段,结果表明成功建立相应载体.将pPIC9K-N经Sac Ⅰ线性化后电转化毕赤酵母宿主菌GS115获得阳性重组菌,重组子经G-418筛选后表型鉴定为Mut+,且PCR鉴定为阳性.阳性重组子经甲醇诱导表达,在96h表达产物量最大,SDS-PAGE显示表达产物大小均约为15kD,Western blotting表明表达的N蛋白能与相应型阳性血清发生反应,具有良好的反应原性.
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2006年夏季发生、波及全国多个省份的"猪高热病"(农业部公布为高致病性猪蓝耳病变异毒株所致),给许多农村养殖户和规模猪场造成了重大损失.2006年8月至2007年底,受有关单位邀请,笔者以"猪高热病在规模猪场的发生特点及防控技术"为题,在广东河源、湖北宜昌、辽宁丹东、陕西西安、河北石家庄、廊坊、保定、邯郸和唐山及河南省各地,共举办了56场(次)的技术讲座.有关"猪高热病"的发病特点.临床症状及病
2006年夏季以来发生的猪高热病,影响了湖南省数十个县市,造成了重大经济损失。总结防控猪高热病的一些经验教训有很多,其中“病性不清,防治茫然”是一个重要方面。为便于诊断分析,首先从该病基本情况的回顾开始。本文介绍了流行病学特点，阐述了猪高热病的临床症状，分析了解剖变化，探讨了检验与诊断的方法。
生猪“高热性病”,自2005年7月份开始,近三年来,每到7月中旬就在我们地区暴发,该病传染速度快,播及面广,给农民养猪带来了很大的损失,特是今年,由于气温偏高,病情复杂,本地区发病率高达90％以上,死亡率在20-80％。为了加强猪高热性病的防治,加强广大农民对生猪高热病的认识,本文就该病的发生情况和防治方法进行了总结，浅谈了治疗体会。
应用建立的两个多重PCR方法,对2005-2006年收集于江苏地区的211份猪高热病疑似病料进行检测,结果PRRSV阳性率为51.2％;PCV阳性率为44.1％:CSFV阳性率为10.4％;PPV阳性率为3.9％:PRV阳性率为2.4％.同时发现,2005年病料中PCV2的阳性率为21.2％,2006年为73.2％;2005年PRRSV的阳性率为38.1％,2006年为67.7％.2006年猪高热
从2006年9月-2008年5月河南省发生猪高热综合征的113家规模化猪场222头病死猪的153份肺、54份关节液、66份心血、5份脑,8份脾脏、4份淋巴结和1份脓汁共291份病料中分离致病性细菌.通过培养特性试验、生化试验、PCR、毒力试验、血清学试验鉴定了246株主要的致病细菌,其中大肠杆菌75株,链球菌125株,沙门氏菌6株,巴氏杆菌16株.波氏杆菌14株,副猪嗜血杆菌10株.对其中的沙门氏
高致病性猪蓝耳病去年以来在全国22个省、市、自治区流行蔓延,重庆市也不例外,流行高达35个区县,占全市的87.5％。这次大流行给养殖户造成重大经济损失,给养猪业带来严重灾难。本文介绍了猪白细胞干扰素在永川区关勇猪场和军医大学动物实验场的治疗过程和效果。
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