【摘 要】
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目的探讨钙素结合蛋白(Cacy BP/SIP)在慢性淋巴细胞白血病(CLL)凋亡及增殖中的作用机制。方法首先收集了15例CLL患者外周血中的B细胞,通过Western blot及RT-PCR检测Cacy BP/SIP在CLL中的表达情况。并统计分析Cacy BP/SIP的表达与CLL的Rai分期、性别及年龄的相关性。进一步在CLL细胞中过表达Cacy BP/SIP,通过Annexin V/7-AA
【出 处】
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第四届全国血液肿瘤学术大会暨第七届全国淋巴肿瘤诊治进展研讨会论文
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目的探讨钙素结合蛋白(Cacy BP/SIP)在慢性淋巴细胞白血病(CLL)凋亡及增殖中的作用机制。方法首先收集了15例CLL患者外周血中的B细胞,通过Western blot及RT-PCR检测Cacy BP/SIP在CLL中的表达情况。并统计分析Cacy BP/SIP的表达与CLL的Rai分期、性别及年龄的相关性。进一步在CLL细胞中过表达Cacy BP/SIP,通过Annexin V/7-AAD双标检测了细胞凋亡情况,同时检测了凋亡相关蛋白caspase3的活化形式。另一方面,构建Cacy BP/SIP的干涉载体,建立含有该载体的CLL细胞株,通过CCK8及流式分析了细胞增殖和周期进程,并通过western blot检测与之相关的蛋白的表达情况。结果 Cacy BP/SIP在CLL临床样本中均有表达,统计结果显示,与Ⅰ、Ⅱ的CLL的患者相比,Cacy BP/SIP在Ⅲ/Ⅴ期患者中表达量较低,且与年龄和性别无显著差异。细胞系水平实验结果显示,过表达Cacy BP/SIP显著地促进了CLL细胞的凋亡,凋亡率达到80%,活性形式的caspase3表达量明显上调;反之,利用慢病毒载体沉默Cacy BP/SIP在MEC-1细胞中的表达却有效促进了该细胞的增殖,尤其是促进了处于G1的CLL细胞向S期转化,调节该细胞周期进程的p53及p21的表达水平明显降低,促进了周期蛋白cyclin E的积累。结论 Cacy BP/SIP的表达与CLL的临床分期级别呈负相关,级别越高,Cacy BP/SIP的表达量越低;Cacy BP/SIP在CLL细胞中过表达能够活化caspase3,促进CLL细胞的凋亡;降低Cacy BP/SIP的表达能够显著抑制p53、p21的活性,促进周期蛋白cyclin E的表达,加速CLL细胞的增殖和G1-S期转化。
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